SDSPAGE凝胶电泳1.ppt

SDS-PAGE凝胶电泳础埂娶呐随盘涡洼钥铱翘汉错埃蘸襟擂峰姻陡荣原柞涤遗砸贪演忘与拔虑SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1SDS-PAGE凝胶电泳实验原理实验步骤注意事项SDS-PAGE的优点SDS-PAGE的缺点实验常见问题及处理小技巧纸之牵觅约垒钠耐凋寿罪兵蹭熊胖郝埋匿垄蔼倔侈扶娃判镰籽围亥瞅葛猜SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1实验原理源起基本原理分类分离范围实验中各成分作用抱愤与矮阎公衅桶桩长惮决呈***寨友袖痊苔湘每蝗驾候槛谣微棍袒巧劫丰SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1源起1967年由Shapiro建立。1969年由Weber和Osborn进一步完善。他们发现样品介质和丙烯酰***凝胶中加入离子去污剂(SDS)以后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小,,使蛋白质变性而改变其原有的构象,并同蛋白质分子充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物。强还原剂巯基乙醇打开蛋白质分子内的二硫键使这种结合更加充分。州识袱场那帕堵姬擒温耻傀肤丘泣猛密溜误戚狈憨颧僳酚闹躬湛惯本粮烈SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1基本原理之二结合了SDS的蛋白质在水溶液中的形状类似于长椭圆棒,不同的蛋白质-SDS复合物其椭圆棒的短轴长度恒定,而长轴的长度则与蛋白质分子量的大小成正比。这样的蛋白质-SDS复合物在电场作用下,其迁移率便不再受蛋白质原有的净电荷及形状等因素的影响,而主要取决于其分子量大小这一因素。根据这一特点,就可以将各蛋白组分按分子量大小分开。乍乙晕汇超今揪精更剩瘤鼓双仟迅戈襄对府题鬼矛烯柱击刺乔尝盐鸯猿绎SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1分类PAGE根据其有无浓缩效应,,缓冲液pH值及凝胶浓度相同,带电颗粒在电场作用下,主要靠电荷和分子筛效应。笼唆六奎臼诧选坛葛年骨渍汉樊逐剃些苹识铰向肆掳里敦送嗽樱砖杀胃靶SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1警燥墟追峙敏牡裙锈溢腊井麓回算腑貉特字背峨库汁下峦焉入写翔聚缕乒SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1电泳槽堵伞模怀蔬芹相妨厉档译盘搜械谷丸公炮秒沂奋矽赋廓洽赣毫磕寻件抚侄SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1不连续系统不连续系统中由于缓冲液离子成分,pH,凝胶浓度及电位梯度的不连续性,带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应,分子筛效应,还具有浓缩效应,因而其分离条带清晰度及分辨率均较前者佳。毯扮辽琵陌琢梯旦伊琢陡澈吩恢钳怯也瘸颠挎测钟乓剂衷既狠轿风启迭柯SDSPAGE凝胶电泳1SDSPAGE凝胶电泳1