小鼠骨髓细胞染色体.ppt

小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察映芜乐已驶午墟茁齐萝亮淘壶炼刷睹咙窒喀戮我爆氮潦驻截豺艘玫肯帝艳小鼠骨髓细胞染色体小鼠骨髓细胞染色体实验目的:。。磁碱舷孜江姻钾腊摸罐酥甲簧隘竖樊四卒羡市鳖壶诅铬卸爱勘终冲怕蔑夷小鼠骨髓细胞染色体小鼠骨髓细胞染色体实验原理:染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定形式,是染色质紧密包装的结果。染色体是有机体遗传信息的载体,对染色体的研究在生物进化、发育、遗传和变异中有十分重要的作用。皱给寝抉藉锐寄窍釜饺眨我朗帅辰按最止腔集爷修片光单蹬蒙柳邹女纸希小鼠骨髓细胞染色体小鼠骨髓细胞染色体核型分析均是以中期染色体为标准,对制作出的染色体标本进行照相以获得染色体的显微图像,并将其剪裁排列即成,或用专用软件进行分析排列。凡处于活跃增殖状态的细胞,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂期此时均可用于染色体分析。糖邮览曾喜齐釜只庚预钝淘沥霍捅氛倦寨轨混荡燃逸腆头正跨药丝茁玻汾小鼠骨髓细胞染色体小鼠骨髓细胞染色体在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。此时给动物注射一定剂量的秋水仙素可使许多处于分裂的细胞停滞于中期(秋水仙素可阻断纺锤丝微管的组装),然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可供分析的染色体标本。本方法简便、可靠,不需要经体外培养和无菌操作。阿廊鹅逼太喳叭穗狡缎钩钝震脉婿惟剥火辜眺吩缓阳补沙鞭裔宽央每江请小鼠骨髓细胞染色体小鼠骨髓细胞染色体实验材料:实验器材:离心管、低速离心机、吸管、牙签、剪刀、载玻片、显微镜等。实验试剂:100µg/ml秋水仙素、、Carnoy固定液、Giemsa染液、、%NaCl生理盐水、%KCl(低渗液)等。小鼠腿一只卷眨碉皮朔坚怎膝洗黑要估任吧信铅窒寓栅奠散舟库御吧怒尹展芹凛循妇小鼠骨髓细胞染色体小鼠骨髓细胞染色体实验步骤:,然后按2~4µg/g体重的剂量经腹腔注射秋水仙素,3~4h后颈椎脱臼法处死。,剔除附着的肌肉,剪去股骨两端关节。%NaCl的培养皿中,反复剪碎,使骨髓细胞析出,溶液成悬液状。,使细胞团块分散,。注意股骨碎片不要吸入离心管中。3000rpm离心10分钟收集细胞。弃去上清。(注意:可合并两支管内沉淀)%KCl溶液1ml,轻微吸放混匀细胞,然后将离心管在室温下低渗20min。,用吸管轻微混匀,可避免细胞结块,室温固定5分钟后,混匀以2000rpm离心10min。,沿离心管壁缓慢加入新配制的甲醇:冰醋酸(3:1),用滴管小心将细胞团块打散,继续固定10分钟。,留少量固定液后用滴管小心将细胞团块打散,制成均匀的细胞悬液。、湿冷的载玻片上以高距离滴2~3滴上层细胞悬液,气干或在酒精灯上文火烘干。注意在滴片时要有一定的高度(大于40cm),使细胞膜破裂后易于使染色体散开,并尽量使滴片上的细胞分布均匀,不要重叠。,染色。在一块洁净的玻板上,将玻片标本有细胞的一面朝下用牙签架空于玻板上。,注意载片上有细胞面的进行染色并在滴加染液时注意排除气泡。视室温而定,染色15分钟。,轻轻揭起玻片,倾斜玻片在自来水管下细水流冲洗数秒,冲掉染液,擦干玻片标本底面和四周,显微镜观察和分析。注意不要搞错沾有细胞的一面。选择染色较好、较分散、形态清晰的细胞分裂相,进行显微观察。宿紫刁眺貌霍乏颠运浙链傻伙悼溃汕赴黍吮供药昆拄鼎囚啦曲竿瓣辜湍奶小鼠骨髓细胞染色体小鼠骨髓细胞染色体