PSRPK在E.coli内与共表达的PRB相互作用.pdf

PSRPK 在 内与共表达的 PRB 相互作用
生命科学学院生物技术专业王丹
学号:2002302007
【摘要】prb 是本课题组在前期研究中通过酵母双杂交从多头绒泡菌 AD 库中筛选出的一
个可能的 PSRPK 相关蛋白基因。为证明 PRB(RNA-binding protein like protein of Physarum
Polycephalum)与 PSRPK 间的相互作用,本研究构建了 prb 与 pGEX-5X-1 的重组质粒,并
转化到含 pET28-psrpk 重组质粒的大肠杆菌 BL21 中。在大肠杆菌中共表达 PSRPK 和 PRB
后,用谷胱甘肽凝胶特异吸附大肠杆菌破碎液上清中的 GST-PRB,通过免疫印迹检测检测
到 6XHis-PSRPK 的存在;用 Ni-NTA 胶特异吸附大肠杆菌破碎液上清中的 6XHis-PSRPK,
通过免疫印迹检测到 GST-PRB 的存在,说明两种 pull-down 检测结果都能证明 PSRPK 与 PRB
间存在相互作用。
【关键词】多头绒泡菌;PSRPK;PRB;相互作用
【教师点评】王丹同学通过原核细胞共表达并结合 pull-down 技术研究了多头绒泡菌 PRB
和 PSRPK 间的相互作用,得到了可靠的实验结果。该方法是研究蛋白间相互作用的一次创
新。该论文的写作规范、严谨,是一篇优秀的毕业论文。王丹同学在实验研究过程中好学、
勤奋、严谨,表现出良好的协作能力、一定的创新能力和良好的品格。
点评教师:刘士德副教授
The interaction between PSRPK and co-expressed PRB in
【Abstract】prb, a possible PSRPK-related protein gene, was baited out from the AD library of P.
polycephalum by PSRPK through yeast two-hybrid in recently. In order to testify the interaction
between PRB (RNA-binding protein like protein of Physarum Polycephalum) and PSRPK, the
reconstituted plasmid of pGEX-5X-1 with prb was constructed and transformed into BL21
which containing the reconstituted plasmid pET28-psrpk. After induced by IPTG, the reconstituted
PSRPK and PRB can be seen co-expressed in BL21. After the GST-PRB in suspending
lysates was adsorbed by glutathione beads, the pull-down 6XHis-PSR