蟾酥对青霉、曲霉、根霉生长抑制作用的研究.doc

蟾酥对青霉、曲霉、根霉生长抑制作用的研究
【摘要】用不同浓度的蟾酥药液,采用圆形滤纸法就其对青霉、曲霉、根霉的生长是否有抑制作用进行研究。结果表明:蟾酥对青霉、曲霉、根霉的生长没有抑制作用。
【关键词】蟾酥青霉;曲霉;根霉;抑菌圈
蟾酥对致病菌是否有抑制作用仍在不断的探索当中,现在已证明蟾酥对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌及痢疾杆菌有抑制作用。但对青霉、曲霉、根霉等真菌是否有同样的抑制作用仍未见报道。本实验通过圆形滤纸片法研究蟾酥对青霉、曲霉、根霉三种真菌生长是否具有抑制作用,目的是为进一步的深入研究提供依据。
1 材料与方法
材料
蟾酥的制备蟾蜍购置于牡丹江地区。洗净其体表后,运用竹刺挤浆法挤净蟾蜍耳后腺的白色液体,涂于洁净的玻璃板上,待阴干后将其刮下研成细粉状置于洁净的玻璃瓶内,放在干燥、阴凉处保存,备用。
蟾酥的主要成分蟾酥的成分很复杂,包含两大类物质,一类是生物原氨基,这类物质一部分由邻苯二酚衍生物组成,一部分由吲哚系碱类组成,如S-羟色胺、蟾酥特尼定、蟾酥流堇等组成。另一类物质是蟾毒配基B和蟾酥毒素。
菌种本实验选用的菌种为根霉、曲霉、青霉,属于真菌,由牡丹江师范学院生物系微生物实验室提供。
马铃薯培养基(PDA)的制备(自然pH值) 马铃薯培养基的配方: 马铃薯(去皮) 200g,蔗糖20g,水1000ml。
主要仪器高压灭菌锅,食用菌接种器(SS-2801),恒温培养箱(JT75-2),电子天平(BP2110)。
实验方法
蟾酥药液的制备用电子天平分别称取120mg和200mg的蟾酥药粉加10ml的蒸馏水,分别配成12mg/ml和20mg/ml的不同浓度的蟾酥药液,封好,备用。
灭菌将备用的锥形瓶、移液管、拖菌耙、培养皿、蒸馏水、直径1cm圆形滤纸片封好,放在高压锅内灭菌,温度121
℃,时间30min。
菌悬液的制备取活化的青霉、曲霉、根霉在食用菌接种器上的酒精灯火焰旁,用灼烧冷却后的接种环在试管内挑取少量菌苔,并迅速放入试管中,分三个试管分别放入,不断的摇动,封好。达克宁稀释液也依此法制备。
涂菌和放滤纸片在无菌的条件下,将已融化并冷却至45℃左右的马铃薯培养基倒入无菌的培养皿中,待凝固后,,然后用玻璃耙子将菌平推于培养皿的培养基上,再将剪好的园形滤纸片侵入12mg/ml和20mg/ml的蟾酥药液和达克宁药液的稀释液中,待滤纸片浸润后,立即拿出,每个培养皿中放三个滤纸片,滤纸片在培养基上呈三角形放置,然后将培养皿用灭菌的纸包好,倒置于恒温的培养箱中,温度30℃,时间24h。同理,以达克宁药物作为对照的也照此方法处理。24h后观察其效果。
2 结果
通过观察四次实验的结果可以看出,当蟾酥的药液浓度为12mg/ml时,蟾酥对青霉、曲霉、根霉三种真菌的抑制作用并不明显,几乎对其生长没有抑制作用,因此又将蟾酥药液的浓度提高到20m