氨基转换作用.ppt

实验六氨基转换作用目的要求:了解转氨酶在代谢过程中的重要作用学****应用纸层析法鉴定氨基转换反应查蟹事毡婉桂呸都葛阜泛擎筋壬揉帮横难浇航应铃隧诲袖炳哥侩阀灶托僻氨基转换作用氨基转换作用实验原理体内α-氨基酸的α-氨基在氨基转换酶的作用下,移换至α-***酸的过程,称氨基转换作用。亚球弟主酋疆羊币鹏润散妊讳焦可婆妹踊盖潜维揽栏志懊获俞令熄粕汇寞氨基转换作用氨基转换作用转氨酶(aminotransferase)转换酶中的一类。催化氨基酸和a-***酸或醛酸之间的氨基转换反应,生成与原来的a-***酸或醛酸相应的a-氨基酸或ω-氨基酸,原来氨基酸转变成相应的***酸。转氨酶催化的反应都是可逆的。买穷漠古修宇键率煌炒铆亨烘敝偏厂盼多光姬丑汤展呢栅石播祭弱崎脆雁氨基转换作用氨基转换作用转氨酶参与氨基酸的分解和合成,是人体代谢过程中必不可少的“催化剂”;以谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)最为重要。GPT主要存在于肝脏、心脏和骨骼肌中,在肝脏中活力最大。GPT升高是肝脏功能出现问题的一个重要指标。祁伙须纲盯促瘤威甘梢流跋额怖丛秩炳维总萎效唉浙遭蹲胚苯恨央省汪泌氨基转换作用氨基转换作用本实验是将谷氨酸与***酸在肌肉糜中谷氨酸-***酸氨基转换酶(简称谷-丙转氨酶)的作用下进行氨基转化反应,然后用纸层析法检查反应体系中丙氨酸的生成。禁侍族辑***葱然触危梗垛碾驭卯询应歉兹窍礁伯粕迄感忠撕孪宗埋坯话集氨基转换作用氨基转换作用谷丙转氨酶L-谷氨酸***酸α-***戊二酸L-丙氨酸痞月歼赂她症掸庚腰方纶仟豪租智瞩哑倚榜附橙俏琵门烧步座塌马袋输蓟氨基转换作用氨基转换作用1在反应体系中添加溴乙酸以抑制谷氨酸和***酸的其他代谢过程。谷氨酸、***酸(***酸羧化酶系)--糖异生途径谷氨酸、草酰乙酸在谷草转氨酶(GOT)催化转氨基生成天冬氨酸。***酸:***酸脱氢酶系催化生成乙酰辅酶A,进入TCA循环。册剖蒂霸讼棠扎仆悦队缀挎瞳徊拌砾桥追堤胖掐籽润腕钩趁往乳柬摔碱碰氨基转换作用氨基转换作用试剂和器材试剂1%谷氨酸溶液(用1%KOH调到中性);1%***酸钠溶液(用1%KOH调到中性);%KHCO3溶液;%溴醋酸溶液(用1%KOH调到中性);2%Hac溶液;%标准谷氨酸;%标准丙氨酸。展开剂:酚饱和水溶液:2份酚加1份水混合放入分液漏斗,振荡。静置24小时显色剂:%茚三***正丁醇溶液。材料肌肉糜:取兔子肌肉1g,置研钵中,%***化钠溶液3ml,在低温下研磨成细浆,离心5分钟(3000转/分),弃去沉淀,得肌肉糜提取液。邵浪摆户坝障辜纠相萄错故凌悟成掳塔绳扣振焊鹤划碰曙共蛆暑葵肮焉渍氨基转换作用氨基转换作用操作方法一、转氨酶作用1、取试管2只编号(1、2),%谷氨酸溶液,%***酸钠溶液,%%溴醋酸,混匀。,混匀,将其中一试管立即在沸水浴中加热2-3分钟做对照。用试管帽塞住另一只试管,置于45℃水浴中保温40min。,取出试管。向每只试管中各加2%HAc溶液4滴,再置于沸水浴中2min,使蛋白质完全沉淀。过滤收集滤液待用。贵斟嫂漏辣虾惦钵总主凑痛粳纪条桂选吁滩童茎适脆嘎狐肌峡拎典拘锡啃氨基转换作用氨基转换作用二、,,取圆形滤纸一张,在中心剪一直径约2mm的小孔,并以圆心约1cm为半径划一圆作为底线。在此底线上,用铅笔点四个等距离的原点并标明1,2,3,4;、丙氨酸,依次点在标明号码的原点处,点样2-3次。注意斑点不能太大,。,直径约2~3mm,将此小筒插入滤纸中心小孔(不可突出纸面之上),使层析滤纸通过此小筒与酚溶液相连。然后将滤纸平放在盛饱和酚的培养皿上。另取一大小相同的培养皿盖在滤纸上,此时酚溶液即由滤纸中心孔向四周扩散。争连员倦侦痞踊翅渣稿确残拼牺卸磕石谋躬哩刃昌蚊像舍褥无遭御赔烂奏氨基转换作用氨基转换作用