姚敏杰基于磁性微粒和荧光微球的DNA检测方法研究西北大学硕士学位答辩.pptx

西北大学硕士学位论文答辩基于磁性微粒和荧光微球的DNA检测方法研究答辩人:姚敏杰专业:分子微生物学导师:陈超教授崔亚丽教授西北大学生命科学学院2007-、敏感性、样品制备和标记繁琐、仪器的研制和机械化程度不高大规模、高通量快速、自动化程度高DNA芯片技术敏感性较低特异性好bDNA技术工作量大,实际应用受到限制假阳性率较低差异杂交灵敏度低,操作繁琐复杂特异性强印迹杂交不能鉴定所测基因的相对分子质量,而且特异性较差,有一定比例的假阳性。操作简单,事先无需对核酸样品进行特殊处理,一张膜可同时检测多个样品斑点杂交/狭线杂交组织原位杂交操作繁琐,费时耗力特异性高,可精确定位菌落原位杂交原位杂交缺点优点方法种类西北大学硕士学位论文答辩4磁性微粒技术磁性微粒的研究始于上世纪70年代,它除具有纳米颗粒的特征外,还可以通过表面的功能基团进行修饰,共价偶联蛋白、核酸等有机/生物分子,并且具有顺磁性,可在外加磁场的作用下快速移动和分离而广泛应用于免疫学检测、靶向载药、细胞分选、酶的固定化以及分子生物学(DNA和RNA的测序与纯化)等领域中。技术优势灵敏度高、特异性强实用性、操作性强仪器设备简单、省时省力西北大学硕士学位论文答辩5荧光微球技术液态悬浮芯片技术是指一项将核苷酸、抗原、抗体、受体、肽链及酶底物等生物大分子结合在荧光微球表面,根据生物测定的原理,与待测样品中的相应物质发生特异性反应,然后借助流式细胞仪对检测结果进行实时定量化分析的技术。技术优势高通量、快速分析高特异性、高精确性、高灵敏度省时、省力、’3’+5’3’后续检测分别代表不同的碱基标记物图解单碱基链延伸反应的原理引物西北大学硕士学位论文答辩8本研究的意义有助于建立经济、快速的DNA固相检测方法有助于高通量、高灵敏度、高特异性和自动化的DNA检测方法的建立有助于对遗传疾病、肿瘤、传染病等的迅速诊断,有助于司法部门对罪犯的鉴别、性别鉴别、器官或组织移植的配型等领域的研究与应用西北大学硕士学位论文答辩9实验一基于磁性微粒的DNA杂交检测实验原理探针与磁性微粒的偶联靶片段的扩增单碱基链延伸荧光信号的引入以及结果的读取实验小结研究报告10检测原理示意图实验原理A:jingwenChen等检测SNP原理示意图[1]B:本研究设计原理示意图[1]jingwenChen,-BasedAssayforMultiplexedSingleNucleotidePolymorphismAnalysisUsingSingleBaseChainExtension[J].,10:549-557