课题1微生物的室培养.doc

课题1微生物的实验室培养【课程目标】了解培养基的基础知识,进行微生物培养和无菌技术的操作。【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作基础知识一、:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质叫培养基。可分为培养基和培养基。:各种培养基一般都含有、、和,此外还要满足微生物生长对、以及的要求。、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?[来源:Z#xx#]【补充1】碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。【补充2】培养基包括哪些营养成分:碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等,蔗糖是提供碳源的,也就是提供能源的,琼脂是凝固剂氮源:如N2、氨盐、***盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。二、无菌技术:阅读“无菌技术”,讨论回答下列问题:(一)获得纯净培养物的关键是,具体操作如下:[来源:学#科#网Z#X#X#K]、操作者的和进行。、和等器具进行。,实验操作应在附近进行。。(二)。常用的方法有、、消毒法。。常用的方法有:、、灭菌。分别适用于那些用具?〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是什么?〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是;随后关闭排气阀继续加热,气压升至,温度为,并维持min;最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至时打开锅盖,其目的是防止实验操作----大肠杆菌的纯化培养:本实验所用的培养基是,本实验可分成和两个阶段进行。一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是:、、、、。〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作要迅速,原因是什么?溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么?〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质?:待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:①在火焰旁右手拿,左手;②使锥形瓶的瓶口;③左手将培养皿,右手,立刻盖上皿盖。④待平板冷却凝固后,将平板。〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?〖思考8〗倒平板的目的是什么?〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板能否培养微生物?为什么?〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么?,试管为什么要加塞棉塞?二、纯化大肠杆菌微生物接种:最常用的是法和法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是:①将在酒精灯火焰上灼烧直至。②在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到的目的。④将冷却的接种环伸入到。⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙,把接种环,盖上皿盖,不要划破培养基。⑦灼烧接种环,