实验四 酶的特性实验.doc

说明:本实验由四个小实验组成,其中第一个实验(酶的专一性)必做,其他三个小实验选做(至少做一个) 写实验报告时, 可以只写需要做的实验内容! 实验四酶的特性实验一、实验目的酶是生物催化剂, 生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、 PH 对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验内容本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、 PH 对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响 4 个小实验组成。(一)酶的专一性 1 、实验原理本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例, 来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性, 唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖, 但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜, 能氧化具还原性的糖, 生成砖红色沉淀氧化亚铜。 2 、材料、仪器与试剂(1) 材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2) 仪器:恒温水浴;沸水浴;试管及试管架; (3) 试剂: 2% 蔗糖溶液; 溶于 % NaCl 的 % 淀粉溶液; 班氏试剂。 3 、实验操作(1 )稀释唾液的制备①唾液的获取用一次性杯取一定量的饮用水, 漱口以清洁口腔, 然后在嘴中含 10-20ml 饮用水,轻漱 2min 左右时间,即可获得唾液的原液,内含唾液淀粉酶。②不同稀释度唾液的制备(用大试管) 本实验需制备 1:1、1:5、1: 20、1: 50、1: 200 等五个不同浓度的稀释唾液。举例说明: 1:5 指的是稀释了 5 倍的唾液,制备方法为 1 份原液+4 份蒸馏水。 1: 20 指的是稀释了 20 倍的唾液,制备方法为 1份1:5 的稀释液+3 分蒸馏水。(2 )唾液淀粉酶最佳稀释度的确定(严格按表 1 添加顺序做实验,用小试管做实验) 表1 唾液淀粉酶稀释度的确定管号 1(1:1)2(1:5)3(1: 20)4(1: 50)5(1: 200 ) % 淀粉溶液(滴)44444 稀释唾液( ml)11111 37℃恒温水浴中保温 5 分钟班氏试剂( ml)11111 沸水浴 2~3 分钟实验结果(2 )淀粉酶的专一性表2 淀粉酶专一性实验(二)温度对酶活力的影响 1 、实验原理酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下, 酶的反应速度最高。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色, 糊精按其分子的大小, 遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色, 麦芽糖遇碘也不呈色, 在不同温度下, 淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合管号 123456 % 淀粉溶液(滴) 4-4-4- 2% 蔗糖溶液(滴) -4-4-4 最佳稀释度唾液( ml )--11 ――煮沸过的最佳稀释度唾液( ml )----11 蒸馏水( ml )11---- 37℃恒温水浴中保温 5 分钟班氏试剂( ml )111111 沸水浴 2~3 分钟实验结果物遇碘呈现的颜色来判断。 2 、材料、仪器与试剂(1 )材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2 )仪器:试管及试管架;恒温水浴;冰浴;沸水浴; (3 )试剂: 溶于 % NaCl 的 % 淀粉溶液; KI - I2 碘溶液; 3 、实验操作取4支干燥的试管,编号后按下表加入试剂: 表3