蜂针对胶原诱导关节炎大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响.doc

蜂针对胶原诱导关节炎大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响
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周颖芳,黄胜光,李万瑶
(1 广州医学院第三附属医院,广州 510150 ;2 深圳市第六人民医院,深圳 518052;3 广州中医药大学,39蜂疗网,510405 )
[摘要] 目的:观察蜂针对胶原诱导关节炎(CIA )大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴) 的影响。方法:采用弗氏不完全佐剂乳化的Ⅱ型胶原乳剂造模。将53只造模成功的大鼠随机分为模型组、蜂针肾俞组、蜂针后三里组、西药组、蒸馏水组等,并设立正常组进行对照。其中西药组 13 只大鼠,其余各组每组10只大鼠。结果:蜂针组与西药组大鼠的 IL-1、IL-6 及 TNF-α等致炎细胞因子水平低于模型组,差异有统计学意义(P<) 。与模型组比较,蜂针肾俞组、蜂针后三里组大鼠的 CRH 和 ACTH 水平低于模型组,差异有统计学意义(P< 或 P<) ;蜂针肾俞组大鼠的COR 水平高于模型组,差异有统计学意义(P <) 。结论:蜂针可有效抑制CIA 大鼠体内细胞因子的水平,改善 HPA 轴免疫调节的作用。
[关键词] 蜂针;胶原诱导关节炎;下丘脑-垂体- 肾上腺轴
类风湿性关节炎(RA)是一种慢性进行性关节病变为主的自身免疫性疾病,在临床上,蜂针治疗类风湿性关节炎的疗效已逐步得到公认,但具体的作用机制尚处于研究当中。建立 RA 动物模型是进行 RA 研究的重要环节,目前RA的动物模型有多种,在国内外已有很多与Ⅱ型胶原诱导的关节炎(Collagen-Induced Arthritis ,CIA )动物模型的临床表现、病理组织学及免疫学相关的研究。其主要表现为多发性末端关节炎,关节局部红肿,病理变化为增生性滑膜炎,关节软骨破坏,关节腔内大量炎性细胞浸润。由于 CIA 动物模型病理特征与 RA的相似性,被广泛应用于 RA 发病机制及治疗方面的研究。随着分子生物学和免疫学的发展,发现细胞因子、下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)等在类风湿性关节炎的发病过程中均起着重要作用。因此,本课题通过注射弗氏不完全佐剂乳化的Ⅱ型胶原建立 CIA 大鼠模型,借以阐释 HPA 轴在治疗类风湿性关节炎中的作用机制。
1 实验材料及方法
动物与材料
选用 SPF级SD大鼠80只,雄性,体重180±20g,由广州中医药大学动物中心提供(动物合格证号0014811,0015810,0014991)。
牛Ⅱ型胶原蛋白,Chondrex 公司,批号为050266 ;弗氏不完全佐剂(Freund’s Adjuvant plete,IFA ),美国SIGMA 公司,批号为104K8926;注射用甲氨蝶呤,浙江万马药业有限公司,规格为5mg/支,批号为050504;注射用水,广东神州制药有限公司,批号为 200512282 ;冰醋酸,汕头市光华化学厂,批号为20030301;活蜂(中华蜜蜂),由广州中医药大学第一附属医院提供(产于谭新蜂业有限公司)。
仪器与试剂
SN-695B型放免γ测量仪(上海原子核所日环仪器一厂)。
IL-1、IL-6、TNF-α(批号:060630)放免试剂盒由解放军总医院放免所提供。COR 放免试剂盒(批号:060625)由北京科美东雅生物技术有限公司提供;ACTH 放免试