根系分泌物提取.doc

根系分泌物提取.doc方法二:马尾松根系分泌物的鉴定及化感作用段剑1、根系分泌物的提取分离采用两种不同的试剂进行浸捉,通过GC-MS进行物质鉴定,得出适宜马尾松根系分泌物的提取方法。方法一:分别取马尾松、枫香根际土壤于冇盖玻璃瓶中,按1:3的比例加入85%的乙醇,至于20°C磁力搅拌器,2600rpm浸提24h。再置于20°C高速离心仪屮,3500rpm旋转15mino离心后上清液,置于旋转蒸发仪脱去浸提剂,用乙酸乙酯(1:1)萃取2次,乙酸乙酯相为屮性组分;再用lmol/,再用等量的乙酸乙酯萃取2次,乙酸乙酯相为酸性组分;再用lmol/,再用等量的乙酸乙酯萃取2次,乙酸乙酯相为碱性组分。合并酸、屮、碱性乙酸乙酯相,即为马尾松、枫香根系分泌物提取液。方法二:分别取马尾松、枫香根际土壤置于冇盖玻璃瓶屮,按1:3的比例加入20%乙酸乙酯,置于20°C磁力搅拌器中,2600rpni浸提24h。再置于20°C高速离心仪中,3500rpm旋转15mino离心后的上清液,即为马尾松、枫香根系分泌物提取液。2、根系分泌的鉴定将上述两种浸捉方式得到的马尾松、枫香根系分泌物捉取液,35°C真空旋传蒸发仪浓缩至lml,无水硫酸钠脱水后,供GC-MS测试分析。检测仪器为GC-MSAgilent-6890N/59731(美国安捷仑公司),色谱条件:色谱柱(Agilent122・3832):30n),DB-35ms;进样口温度250°C;程序升温:柱温70°C(2min),以10°C•min-1升温至280°C,20min;载气:He;流速:-1o质谱条件:El源(电了轰击源);轰击电压:70eV;离了源温度:230°C;扫描范围m/z:35-500amu;;检测器电压500V;电流350uA;四级杆温度:150°C;;进样*:;不分流进样oGC-MS数据应用标准质谱谱库NIST02获得,采用面积归一化法计算各类物质的相对含量。方法三:烤烟根系分泌物的研究 高欣欣1、 具体方法为:取定量过滤后的收集液用乙酸乙酯萃取,得到乙酸乙酯相为中性组分;将剩余水相用IMHCI调节pH至2后,再用乙酸乙酯萃取,得到乙酸乙酯相为酸性组分;将剩余水相再用IMNaOH调节pH为8,用乙:酯萃取,得到乙酸乙酯相为碱性组分,将酸性、碱性和屮性乙酸乙酯萃取液分别减压浓缩至lml(45°C),。2、 根系分泌物的硅烷化处理利用常文理于1990年提出的方法,(BSTFA:TMC=5:1),加盖密封后于80°C水浴中衍生2h,待测。原因是什么????3、 GC-MS分析条件经硅烷化处理后的各组分根系分泌物采用Agilent7890A-5975C进行仪器分析测定。毛细管柱采用HP-5MS柱(),进样口温度为250°C,升温程序为50°C(2min),以6°C/min程序升温至250°C(保持15min)o载气为He,流量lml/min,进样量为1卩1,离子源温度230°C,轰击电压70eV。应用NIST98质谱数据库,分析质谱图,确定物质组成。方法