岛津lc-20a型高效液相色谱仪操作规程——相关操作.doc

岛津 LC-20A 型高效液相色谱仪操作规程 1 .实验前的准备 准备所需的流动相, 自动进样器用的清洗液( 甲醇-水 50:50 ), 用合适的有机滤膜( μm) 滤过。流动相装入溶剂储液瓶, 确认吸滤头已置于液面以下。 配制样品和标准品溶液,用合适的滤膜( μ m) 滤过。 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(连接时注意方向)。 2 .开机 接通电源,打开输液泵(脱气机自动打开) 、检测器、自动进样器、柱温箱,顺序无关紧要;等待各仪器单元的指示灯变为绿色时进行下一步操作。 打开电脑,双击桌面“ LCsolution ”图标,单击“仪器 1”,弹出“登录”窗口, 单击“确认”, 听到两声蜂鸣, 表示 LCsolutio n 色谱工作站与仪器联机正常。 在 LCSolution 工作站“仪器参数视图”中“自动排气”项进行排气时间设置, 对输液泵及自动进样器进行必要的 Purge 操作, 排出相应流路中的气泡;检查输液泵在动作前的压力显示值,必要时对此压力进行调零。 3 .参数设定点击“仪器参数视图”进入仪器参数设置界面: 选中“正常”或“高级”项, 分别设定“数据采集”、“ LC 时间程序”、“检测器 A”、“柱温箱”、“控制器”、“自动进样器”等参数。 “泵”参数:“模式”控制送液模式,“泵 A 总流速”设定流速, “溶剂 B( C、 D) 浓度”为各相所占百分比,“压力限制(泵 A)”设置系统所能承受的压力范围, 通常将“最大值”设置为 ,“最小值”设为 0。 “柱温箱”参数: 若使用柱温箱, 则选中“启用柱温箱”复选框,在“柱温箱温度”设定柱温,“最高温度”设定最高保护温度(通常默认 85℃)。 “检测器 A”参数:“灯”项选“ D2 ”表示将灯打开,选“关”则氘灯关闭;“波长通道 1( 1)”处设置检测波长;其余保持默认值。 “数据采集”参数: 选中“采集时间( 检测器 A)”复选框, 设置数据采集的“开始时间”和“结束时间”。 “ LC 时间程序”参数: 如采用梯度洗脱方式, 则须编辑泵梯度洗脱程序, 也可以通过时间程序控制柱温箱温度, 检测波长等参数。 * 参数设定完毕,点击主菜单中“文件”下的下拉菜单“另存方法文件为…”保存方法文件。点击“下载”传送参数。 4 .数据采集方法编辑点击“数据采集”进入采集数据编辑方法界面;点击主菜单“方法”下的“数据分析参数(检测器 A)”编辑数据分析参数, 设置“半峰宽”、“斜率”、“最小峰面积”等数据积分参数。保存方法: 点击主菜单中“文件”下的下拉菜单“另存方法文件”保存数据分析参数。 5 .平衡系统点击“仪器开/关”( 此时“泵开/关”同时开启), 使仪器处于开启状态。系统开始运行,检查各单元参数应与方法设定一致, 等待系统平衡。一般情况下,由于流动相不同,交换平衡时间不同。可以观察检测器输出信号变化,如果输出信号稳定不变,即认为接近平衡,可以调零等待,待基线平稳,压力稳定,系统平衡后,准备进样分析。 6 .进样分析 单针进样分析: 点击“单次运行”图标编辑样品参数:如“样品名”、“样品 ID ”等样品信息;在“方法文件”项调用本次分析的方法文件名,在“数据文件”项选