黑曲霉D2-26乳糖酶分离纯化及酶学性质研究.pdf

崦姑羟蓬辫誉鬻强黑曲霉—乳糖酶分离纯化及酶学性质研究硕士学位弦论文学位申请人:指导教师:学科专业:学位类别:授予单位:答辩日期:贾英民教授农产品加工及贮藏工程工学硕士河北农业大学二六年六月十五日李红飞
为韎琄./籗—,不影响乳糖酶的活性;以为底物采用双倒数作图法测得~℃范围内处理猲,残留酶活均在%以上,在℃下处理相同时间其其摘要乳糖酶是一种水解酶,目前主要应用于食品、医药、分析等领域。本研究以酶工程实验室所保存的~抹黑曲霉—为出发菌株,采用⒔凸薹⒔蜕樘敲浮建立了一套简单易行的乳糖酶提取纯化方法并对纯酶的酶学性质进行了详细研究。,具有生产成本低、提取纯化工艺简单、稳定性好、在生产中可以有效防止杂菌污染等特点,具有广阔的应用前景。黑曲霉—乳糖酶经过滤、超滤、硫酸铵分级盐析、纤维素一离子强度梯度层析、猯凝胶过滤、纤维素层析等纯化工艺分离纯化之后,经篈电泳鉴定得到单~条带,达到电泳纯。比活力提高到痬瘸跏挤⒔鸵罕然钐岣吡倍多。纯化的黑曲霉,乳糖酶以为底物时的酶学性质为:最适温度℃,作用温度较广,在~℃都具有较高的酶活性;在~℃有较高的耐受性,在残留酶活为.%;在胬洳靥跫戮哂辛己玫奈榷ㄐ裕樘敲傅鞍自诘臀轮天后酶活才开始降低;最适为,作用范围较宽,:在条件下贮存其相对酶活力均在%以上,具有较好的耐受性;对乳糖酶有显著激活作用,可使其酶活提高.%,并且许多金属离子都能够在一定程度上提高其酶活性,“、对酶活有较强的抑制作用:对酶蛋白的变性作用严重抑制其酶活性,半乳糖对黑曲霉—乳糖酶有一定的产物,为单亚基蛋白;、酶学性质做了基础性研究,为其工业化生产打下了关键词:黑曲霉:乳糖酶;分离纯化;酶学性质蜒巍梯度基础。
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学位论文作者签名:气缸锣学位论文作者签名:嚏红弘一辍辉耭签字日期;!!阨月愿目独创性声明学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑韭盘些盘堂有关保留、使用学位论文的规阅和借阅。本人授权塑韭盘些盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得巫韭盘些盘堂或其他本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。签字日期:C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ学位论文作者毕业后去向:工作单位:通讯地址:导师签名:年月目电话:邮编:
肴樘腔幻受体———卜半乳糖基一受体浮乳糖酶简介乳糖————卜酶一乳糖;敢蝗樘恰!!!2钒肴樘腔幻葡萄糖;将乳糖水解为葡萄糖和半乳糖;二是催化转移反应,,利用乳糖酶水解乳糖包括三个步黑曲霉—乳糖酶分离纯化及酶学性质研究乳耱酶莆?冢瓺肴樘擒瞻肴樘撬饷参一痝..,。一般来说,该酶有两种催化性质:一是催化水解反应,糖,生成低聚半乳糖“。骤,晟后一步表现为水解或转移活性。2街枞缦拢根据多年的研究推测了乳糖的水解机制,如图荆乳糖酶的活性位点有两个功能团:巯基和咪唑基,其中巯基可作为广义的酸使半乳糖苷的氧原子质子化,咪唑基可作为亲核试剂进攻半乳糖分子的第一个碳原子。当半乳糖苷的受体是水时,发生的是水解:如果受体是糖时,则可以生成二糖或三糖以上的低聚半乳糖。,图樘敲傅乃庾饔没Ⅱ骳
。低乳糖乳和乳制品的生产国外早已河北农业大学硕士学位论文乳糖酶在食品工业、医药工业、分析等方面具有广泛的应用价值。乳及乳制品含有丰富的优质蛋白质、脂肪、,钙磷比例适当,易被人体消化吸收,还含有免疫球蛋白等抗病因子,所以乳及乳制品有“近乎完美的食物”的美称,是人类改善营养、增强体质不可缺少的理想食品。牛乳中乳糖含量约占%~畂%,是乳中最主要的碳水化合物,占其总糖量