草莓pldα cdna克隆及其反义基因遗传转化研究.pdf

新疆农业大学
硕士学位论文
草莓PLDα cDNA克隆及其反义基因遗传转化的研究
姓名:卢秀丽
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:罗淑萍;袁海英
20090601
草莓皿莈寺〖捌浞匆寤蛞糯;,采收后极易腐烂变质,不耐贮藏,在这一过程中细胞壁及细胞膜结构的降解代谢起了促进作用。因此,在果实成熟衰老过程中保持细胞膜结构和细胞区域化结构的完整性具有重要作用。磷脂酶与草莓果实的成熟有关,其活性的增加是细胞膜衰老时受损的第一步,因而有效控制的活性有助于研究基因对草莓果实耐贮性的影响。本研究采用哟锶晨颂草莓完熟果实中提取出纯度较高、完整较好的总肦际趵┰龅玫絇虻腍δ芮基因序列,将其寺≈,测序正确后克隆载体经双酶切消化,目的片断反向插入到植物表达载体中,ü橙诜ń匆錯闹参锉泶镌靥逯柿5既敫┡└菌,并对草莓进行遗传转化研究,以期获得该基因表达的缺陷型植株,进而确定其在草莓果实成熟衰老中的调控作用。在实验过程中同时构建草莓基因正义对两者进行比较。共培养,用液体培养基冲洗叶片,滤纸吸干后转到含‘难≡衽嘌仙秆∨嘌经选择压初步筛选出米;虿葺仓辍6曰竦玫目剐灾仓杲蠵扩增杂交分析,有晡Q粜裕得髂康幕蛞颜系讲葺蜃橹小关键词:草莓;基因;反义植物表达载体;遗传转化;咏草莓植物表达载体.⒍云浣辛艘糯;康氖窃诤笮墓的椭笛橹在农杆菌介导的遗传转化体系中,将培养至对数生长期的农杆菌,用无激素的液体培养基稀释成拗滴..那秩疽海秩疽言づ嘌牟葺杜,只嘌上培养,再转到和~、
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缩略词
翮哗研究生签名:乒鸯丽声虢时间:跏瓿г挛秀缸独创性声明关于学位论文使用授权的说明汐日本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他入已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得新疆农业大学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:新疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文,允许论文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以公布ǹ论文的全部或部分内容。C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵名签名究师研导时间:生签:
,为世界上主要经济作物之一钣⒒鄣龋,其浆果鲜嫩多汁、营养丰富、风味独特,深受广大消费者所喜爱,素有“水果皇后”之称,在世界许多国家都有分布。果实除鲜食外,还可制成果酱、果酒、糖水罐头、速冻果品等,工艺简单,对丰富和繁荣水果市场、发展食品工业均有深远的意义。草莓适应性广,栽培容易,生产周期短、见效快、经济效益高。它还适合与其它作物实行间作、套作、轮作,有利于提高土地利用率,增加经济收益,深受种植者欢迎。但草莓果实采后难以保鲜是生产实践中亟待解决的一个难题。果实的成熟衰老是一个复杂的发育调控过程,其间经历着一系列复杂的生理生化变化,严格受到基因表达的调控。近年来,果实成熟的机理、分子生物学基础及基因表达调控等研究都取得了显著成就,为应用植物基因工程技术培育耐贮运果实品种奠定了良好基础。因此人们试图用基因导入的手段解决草莓的保鲜问题,目前已经能够通过植物基因工程技术来控制果实成熟,现已在番茄中获得成功.,;.,;蚍岩延月在美国获准上市低温保鲜一般分为冰温贮藏和速冻贮藏。冰温贮藏是在嬉韵拢葺岬.℃陨系奈露冉兄乇O剩庵种赜的冷藏条件比较发现,草莓营养成分的变化、烂果率、失重率都很小,而且可使草莓的保质期延长到笥江英等,K俣持厥墙捎每焖倮涠车姆椒ㄊ怪辰幔缓笤诘臀轮斜4妫馐且种长期保存草莓果实,维持风味和营养物质较为理想的方法。对速冻后分别贮藏在.℃及.℃两种条件下的草莓进行品质测定,结果表明,速冻草莓在较低温度贮藏能最大程度地保持草莓原有品质,贮藏期可达个月以上醣α值龋,但创造较低的贮藏温度将花费很大的代价,所以其应用范围受到了限制。草莓多年生草.,.臀卤O新疆农业大学硕士学位论文;猳量曼曼曼曼曼曼曼皇量曼事崖量量曼曼曼曼曼鼍鼍曼曼曼曼皇曼曼曼璺量鼍曼曼曼曼鼍曼曼曼皇曼鼍曼皇曼皇曼鼍曼曼.
辐射保鲜主要利用丫射线、加速电子以及湎叽┩赣谢迨笔蛊渲械乃推渌物质发生电离,生成游离基或离子的原理,对贮藏的水果起到杀菌、防霉和调节生理生化的效应怯陆龋。草莓低剂量辐射保鲜,可以抑制草