高效液相色谱仪操作步骤及注意事项.doc

高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项
一、操作步骤：
1。开机前先将流动相过滤和超声:水流动相用混合滤膜()过滤,有机流动相用有机滤膜过滤，之后超声脱气15－２0分钟。（过滤的目的是除去流动相里的杂质，以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱；超声的目的是排除流动相里面的气体，以防气体进入色谱柱损害色谱柱,影响柱效能）
注：试验过程中由于只有0．45μm的混合滤膜，第一次使用时感觉效果不好,于是过滤水时同时使用两张混合滤膜过滤水流动相。
2．超声结束后，将流动相放置到规定位置(１号泵接水流动相，2号泵接有机流动相）,开机逐个排气（先启动泵,排气结束后再打开检测器）.
3．排气结束后，关闭所有排气阀。先用纯有机流动相冲洗色谱柱2０—3０分钟,基线走稳之后,再打开水流动相(注意：水流动相和有机流动相流速之和为1ｍl/min），继续走基线，直到基线平稳。
注意：实验结束后，再用纯有机流动相冲洗色谱柱20-３0分钟，冲出色谱柱内残留的样品物质，预防长时间不使用仪器样品的残留物质沉积在色谱柱内，导致下次使用难以冲出，色谱柱柱压偏高，基线不稳,出现大量鬼峰.（不同规格的色谱柱其所允许的最大流速之和不同）
４．走基线时，应将进样阀处于Loａd状态，用注射器进样时应快速进样,进样后将进样阀立即扳回到Injｅcｔ状态,,可在数据分析里面查看分析结果并可进行编辑，也可以在脱机状态下查看样品的分析结果并编辑。
二、使用中常见的问题及注意事项
1．过滤时有时会出现流动相漏液。可能的原因是滤膜放置不正确（有点偏）和接头有点错位，导致流动相从缝隙中漏出。
注意：操作时，应先向滤瓶内倒入少量流动相，观察是否漏液并开始过滤，若未漏液，再向滤瓶中添加流动相。
,瓶外液体的液面应高于瓶内流动相的液面，否则流动相内的气体可能无法排出液体，气体仍然残留在流动相内,以致开机排气时无气泡排出。
,应先将流动相流量调小,再关闭排气阀，否则会导致柱压瞬间升高超过压力上限，致使泵停止工作.
4。反相高效液相色谱仪冲洗柱子时,应尽量避免使用纯水流动相冲洗柱子,因为水极性强,会损害色谱柱（反相高效