海马重组激活基因1对大鼠空间学习记忆的影响.pdf

浙江大学医学院
硕士学位论文
海马重组激活基因1对大鼠空间学忆的影响
姓名:陈浩浩
申请学位级别:硕士
专业:人体解剖与组织胚胎学
指导教师:凌树才
20091201
海马重组激活基因源笫罂占溲凹且涞挠跋中文摘要浙江大学医学院师人体解剖与组织胚胎学陈浩浩凌树才教授重组激活基因诹馨拖赴姆⒂墒旃讨衅鸸丶饔茫⒂朊疫记忆功能有关,实验证明,敲除动物的会导致免疫记忆功能缺陷。研究发现并非只存在于免疫系统中,在哺乳动物、两栖动物和硬骨鱼类的神经系统中也都存在,并且其转录产物主要分布在与记忆功能有关的脑区,如海马、小脑。本实验中我们构建了哉攵源笫驲腞干扰重组表达载体及无关序列的载体,采用慢病毒载体系统分别包装鲈靥澹蠓直感染体外培养的大鼠原代海马神经元细胞,通过庖哂〖:陀ü舛縋检测蛋白及的表达,从而选取最佳干扰效果的慢病毒载体。构建的慢病毒载体通过脑立体定位仪,注射入大鼠海马肦甈检测天、天、天慢病毒干扰表达的效果,并通过免疫荧光观察表达以及尼氏染色观察海马结构形态变化。我们选取了注射后天的大鼠进行水迷宫的定位航行与空间探索实验,结果显示注射干扰病与正常组约白⑸湮薷扇判Ч《咀啾让挥邢灾圆钜臁对组大鼠进行离体海脑片长时程增强难芯肯允居隿组比较没有显著性差异。由此我们得出这样的结论:在成年大鼠海马中,表达产物的减少可能不影响大鼠的空间学忆能力。关键词重组激活基因籹;海马;;水迷宫;长时程增强级硕士研究生导至浙江人学顾貉宦畚
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缩写、符号清单、
’撼’簇勿予彳学位论文作者签名:/阮伟%签字日期:。年弓月年日学位论文作者签名:F月争日浙江大学研究生学位论文独创性声明少谀月年日学位论文版权使用授权书签字日期:妒表或撰写过的研究成果,也不包含为获得迸姿态堂或其他教育机构的学位或本学位论文作者完全了解逝姿盘堂送交本论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权逝垄盘堂可研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发有权保留并向国家有关部门或机构以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。导师签名:本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。签字同期:C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ
致谢本课题是在尊敬的凌树才教授的悉心指导和严格要求下完成的。从科研的选题到课题的设计,从科研方法的选择、研究指标的确定到论文的写作,无不渗透着导师的心血。导师对我在实验过程中出现的问题耐心地分析指导,及时与我沟通和讨论,使我能把握好实验的方向、提高工作效率。导师踏实的工作作风、严谨的治学态度、缜密的科研思维使我终身受益,在学和工作上的谆谆教诲,日常生活中无微不至的关怀使我终身难忘,有了导师的辛勤的付出,才有了学生的春华秋实,在此谨向凌老师致以衷心的感谢感谢周苏娅老师在神经电生理实验上对我的帮助,感谢实验室的各位老师和同学在学习、工作、生活诸多方面的帮助和关心。感谢尊敬的答辩委员会专家及评审专家蛭h庇癯晌C烙袢ǹ恳帐跫业难≡和雕琢。最后尤其感谢我的家人,多年来对我学的支持、理解和鼓励。在即将毕业之际,谨向所有关心、帮助和支持过我的师长、同学和朋友致以最诚挚的谢意浙江人学顾貉宦畚
青专学忆是人类和高等动物最具特色的高级神经活动之一。开展学忆方面的研究,对于探索脑的奥秘,开发脑的功能,以及临床治疗学忆障碍和脑的疾病等方面具有重要的意义。重组激活基因钤绶⑾钟诿庖呦低常朊庖呦赴匾煨缘募且浠疃喙亍8没虺诿疫系统中表达外,还特异性的分布于神经组织,特别是海马、边缘系统等与学忆有关的脑区。但迄今为止,人们依然未能明确在神经系统中的分布是否与大脑的学忆功能存在某种必然的联系。本课题构建了特异性抑制海马神经细胞表达的慢病毒载体,并通过脑立体定位注射入大鼠海马,通过神经行为学和电生理方法,研究海马区基因表达被抑制后大鼠空间学忆能力的变化,以及离体海马脑片的突触传递效能的长时程增强浠而探讨海马区的表达与空间学忆之间是否存在一定的关联。本课题得到了国家自然科学基金项目的资助,在海马脑片笛橹校得到了浙江大学医学院神经生物研究所周苏娅副教授的真诚协助。浙江人学颀‘貉宦畚序高
海马重组激活基因源笫笱凹且涞挠跋论浙江大学医学院导师人体解剖与组织胚胎学陈浩浩凌树才教授琑最早发现于免疫系统,有和两种亚型【俊K堑谋嗦氩锕餐钩芍刈槊福芴匾斓厥侗鹈疫球蛋白和赴芴宓腣、、蚱瘟讲嗟闹刈樾藕判蛄校呋疍双链断裂,引起嘏牛