植物呼吸速率的测定.pptx

实验4-1 微量定容测压法测定植物的呼吸速率
一、原理: 1. 在密闭、定温及固定体积的系统中，当气体被吸收时，气体分子减少，压力降低。相反，当产生气体时，压力上升。压力的变化可以用微量检压计测出，并可据此计算气体吸收或释放的数量。因此，微量检压计可用以研究呼吸作用、光合作用及与O2、CO2及其它气体交换相关的反应如某些酶的活性等。
一、原理: 2. 由于在呼吸过程中吸收氧气和产生二氧化碳是同时进行的，所以从压力计上所观察到的压力变化是氧的吸收量和二氧化碳释放量的总结果。若在反应瓶中加入碱液（如氢氧化钾），呼吸时所产生的二氧化碳被碱吸收，则可由压力的变化计算出氧的吸收量。
二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：萌发的小麦种子。（二）仪器设备：1. 瓦布格呼吸计（微量呼吸检压计）；2. 移液管；3. 量筒；4. 小镊子；；
（三）试剂：1. 20％KOH；2. 凡士林；3. Brodie氏溶液：NaCl 23g，牛胆酸钠5g，溶于500ml水中，另加少许染料（酸性品红）使溶液染色，并加数滴浓麝香草酚乙醇溶液作为防腐剂。
三、实验步骤（一）种子吸氧量的测定（测压计用） ：⑴取发芽小麦种子6-8粒，用吸水纸将种子表面水分吸干，称其鲜重（W）。⑵用排水法测定其体积（V种子）：取10ml量筒，内盛约5ml的水，将种子充分放入量筒内，二次水分体积之差即为种子体积。⑶将种子取出，再次用吸水纸吸干附在种子外表的水分，将种子放入反应瓶的底部，。
：⑴在中央小槽内加入20％KOH ，用以吸收CO2。为了增大吸收CO2的能力，可将1cm×2cm滤纸折叠后插入中央小槽内，并在中央小槽口上涂少量凡士林，防止碱液逸出。 ⑵侧管的玻璃棒涂以凡士林后塞紧。压力计口亦涂上凡士林和反应瓶连接，转动反应瓶，使封口凡士林呈透明为止，然后用橡皮筋将反应瓶固定在压力计上。
：将压力计固定在水槽上，并打开压力计活塞。设置恒温水槽温度，启动水槽搅拌装置并启动转盘振荡，使压力计平衡10～15min。在此过程中要注意检查反应瓶是否漏气。
：当反应瓶内温度与水槽温度平衡后，停止振荡，将压力计上的活塞关闭并重新开始振荡，记录开始时间。每隔15min记录压力计左侧毛细管Brodie液面高度（ h ）。读数时暂停振荡，并将压力计的右管液面调至150mm处，记录左管液面高度，共计四次（共1h）。