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微生物实验实训报告
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微生物实验实训报告(一)
资源与应用微生物实****报告
学院：生命科学学院 专业：应用生物科学 学号：20120459020 姓 名： 毛 德 昌
酵母耐糖度、耐酒精度、耐酸度特性的检测
酵母菌是人类历史文明中被利用最早的微生物。酵母菌可以在缺氧的环境中生存。酵母菌是一些单细胞的真菌，在自然也广泛存在，主要生活在偏酸的潮湿的环境含糖环境中。在酿酒业中广泛应用。酵母主要通过芽殖的方式繁殖后代。在不同的培养基浓度条件下酵母的的生长速率以及酵母的活性有所不同。利用血球计数板对发酵后的酵母进行计数，并计算酵母存活率，出芽率。
血球计数板被用来对人体内红、白细胞进行显微计数只用，也常用来对细、真菌、酵母等微生物计数，是一种常见的生物学工具。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，。计数池画有长、，分为9个大方格，=;=。其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，每个中方格用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，每个大方格用单线划分为16个中方格。血球计数板的计数区如下图
酵母死活计数和形态的观察可用吕氏美兰溶液对酵母进行染色。吕氏碱性美蓝染液是一种无毒的染料，其氧化型呈蓝色，还原型为无色。用美蓝染液对酵母菌的细胞进行染色时，活细胞内的还原性物质能使美蓝由蓝色的氧

化型变为无色的还原型 。一、实验过程
选用三株酵母分别对其进行耐糖度，耐酒精度和耐酸度的特性进行测定。 按照如下配方配制耐性发酵培养基
表二，酵母耐酒精度培养基（每瓶200ml培养基；注无水乙醇在接种前加入培养
接种种子液的配制以及接种
配制PDA种子液培养基，用去皮的鲜土豆20g，用80ml蒸馏水煮20min。滤去土豆，向滤液中加入2g葡萄糖，定容至100ml。分装于6支试管中，每支试管15ml液体。分装好后放入灭菌锅中美军30min。灭好菌后在超净工作台上从菌种管中挑适量的酵母菌接种于种子液中。接种好后28
℃培养48h。

培养好后现在显微镜下利用血球计数板对酵母染色后进行计数。记录活细胞和死细胞，将各个菌种液的活细胞浓度调成一致，向每个耐性梯度的培养基中接种入1ml种子菌液。在28℃条件下恒温培养48h后，用同样的方法对酵母进行计数。
二、实验结果
血球计数板计数公式：
1ml菌液中的总菌数=（A/5）´25´10000´B=50000A´B（个）；
A表示五个中方格的总菌数；B表示菌液的稀释倍数。

注：（1）死细胞；（2）酵母菌体；（3）芽体
实验结果统计如下各表
表三，种子液酵母计数
表四，种子液酵母死亡率
将三株酵
母菌的活菌数调到浓度均为9´10个菌体，然后接种于三种耐性培养基的个梯度中，每个梯度1ml，即每个梯度中接种9
´10个菌体。培养48小时后计数结果如以下各表。

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表五，酵母耐酸实验数据

微生物实验实训报告(二)
微生物学大实验
实验题目：土壤微生物的分离纯化与鉴定
一． 实验目的：
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二． 实验原理：
1. 培养基的制备、消毒与灭菌：
培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多。但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。不同微生物对 pH 要求不一样，霉菌和酵母的培养基的 pH 一般是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基的 pH 一般为中性或微碱性的 ( 嗜碱细菌和嗜酸细菌例外 ) 。所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的 pH 调到合适的范围。 此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌，如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。