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实验四微生物细胞大小和数量的测定
•目的要求
•实验材料
•实验程序
•思考题
目的要求
•学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显
微镜下测定微生物大小的方法。
•学数板测定微生物数量的
方法。
实验材料
显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、细菌
染色片、血球记数板、酵母菌悬液、盖玻
片、无菌滴管、西水纸、擦镜纸、香柏
油、二甲苯。
实验程序
•测定微生物的大小
•测定微生物数量
实验程序:测定微生物的大小
测定的工具:目镜测微尺镜台测微尺
实验程序:测定微生物的大小
•目镜测微尺的校正:在高倍镜下,看清镜台测微尺的刻度后,
转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动
器,使目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合,然
后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜
测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每
格长10µm,所以可得:
目镜测微尺每格长度( µm)=(镜台测微尺格数×10)/目镜
测微尺格数
注意:校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的
接物镜、接目镜、镜筒长度等)进行,而且只能在这特定的情
况下才可重复使用。
•菌体大小的测定:取下镜台测微尺,将细菌染色标本置于载物
台上,然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。
实验程序:测定微生物数量
•方法:活菌计数法——平板菌落计数法;总菌计数法——血
球计数板或霍瑟(PeroffHausser)细菌计数板(二者原
理和部件相同,只是厚薄不同而已)。
实验程序:测定微生物数量
•本实验用血球计数板计数酵母菌的数量
1. 取清洁无油的血球计数板,在计数室上面加
盖玻片。
2. 取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一
小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有气泡。
3. 静止5min后,用低倍镜观察并将计数室