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第十章 转基因技术与应用
转基因技术及应用
转基因植物
转基因动物
转基因微生物
转基因技术是将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体的性状的可遗传的修饰，这一技术称之为转基因技术（Transgene technology）。人们常说的"遗传工程"、"基因工程"、"遗传转化"均为转基因的同义词。
转基因技术及应用
第一节 转基因植物 p85
目的基因和受体的获得
转基因方法
转基因植物的鉴定
转基因植物的应用
转基因植物研究存在的问题
转基因技术及应用
一、目的基因的来源
采用限制性内切酶，从生物组织中获取目的基因；
通过mRNA合成cDNA；
人工合成的DN***段；
聚合酶链式反应（PCR）扩增特定基因片段。
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二、转基因植物受体包括：
叶盘、胚轴、茎尖、茎段
原生质体
悬浮细胞
愈伤组织
胚状体
活体
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三、转基因方法
直接导入法
物理法：基因枪法、电击法、超声法、显微注射法、激光微束法
化学法：PEG法，脂质包埋法等
载体介导法：农杆菌介导、病毒介导法
花粉管通道法
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枪击法
将待转化的DNA沉淀在细小金属珠的表面，用特制枪将金属珠直接打入植物细胞，枪的威力为430 m / s，植物细胞通常是胚胎细胞、玉米籽、叶子等，但进去的DN***段整合效率极低。
电击法
将高浓度的质粒DNA加入到植物细胞的原生质体悬浮液中，混合物在 200 - 600 V / cm 的电场中处理若干秒钟，然后将原生质体在组织培养基中生长 1 - 2 周，再生出整株植物。
直接导入法
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融合法
将外源DNA与特殊的疏水性高分子化合物混合，在水中这些疏水性化合物分子形成球状的脂质体，后者与植物细胞原生质体融合，筛选融合子，再生植物细胞壁。
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T-DNA的染色体整合机制
载体介导法
农杆菌介导法p87
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共整合转化程序
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