生物实验室操作规范.docx

内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
生物实验室操作规范
生物实验室操作规范
生物实验室规范
进入实验室需要在实验室使用登记簿上登记，没有经过培训的人员不允许单独进入细胞间；
进第二间屋子换上门口拖鞋，外套脱下，换上白大褂；
进细胞间，换上拖鞋，并换上相应的白大褂；
放在实验室的任何化学药品需要贴上标签，写明试剂名称、联系方式，否则一律垃圾处理；
放入细胞间的物品需用酒精擦拭外包装。放入冰箱的物品外围需用酒精擦拭，然后注明试剂名称、使用者，远离培养基；
有毒、易挥发试剂在外间通风柜内操作；
双手接触过任何未灭菌的东西后，都需用酒精消毒后才能接触灭菌的器具或试剂；
值班同学：晚上开紫外灯，早上关掉；垃圾箱满了倒掉；废液瓶满了，加入次***酸钠后倒掉；所有的仪器是否关闭；试剂是否收好；衣服、鞋子是否摆好。
生物实验室间使用要求
实验前的例行检查与消毒措施
减压阀检查：减压阀是连接在CO2培养箱与CO2气瓶间的减压装置，用于将气瓶内较高的压力降低至培养箱可以使用的压力。靠近气瓶的一级压力表盘指示气瓶内气体压力，当该压力小于时，表明CO2气体不足，应及时购买气体[1]。
远离气瓶的二级压力表盘指针应在之间，若超出此范围请根据箭头指示调节旋钮（注意：a旋钮感觉越紧，阀门开口越大；b指针示数会因为培养箱对橡胶管内气体的间断吸气而跳动，调节旋钮时注意延时因素，并将跳动范围控制到间）。
CO2培养箱检查：温度显示应在（℃）之间，CO2浓度在（%）之间，严禁私自改变设置。底部增湿盘中水量不足1/3，应及时添加无菌去离子水，严禁添加自来水。
培养箱长时间断电重启后，应仅设置温度为37℃，CO2浓度设置为零，待培养箱温度稳定在37℃六小时后，再设置CO2浓度为5%。
医用冰箱检查：医用冰箱在稳定状态下冷藏温度应为4℃，冷冻温度应为-20℃，若示数变化应及时联系管理员。
例行消毒：
在房间无人状态下，每周打开紫外消毒灯30分钟至少2次；
实验前后，用已经被70%酒精浸湿 的纸巾擦拭生物安全柜操作台；
实验前后，分别打开生物安全柜内的紫外灭菌灯至少30分钟；
CO2培养箱底盘去离子水两周 更换一次，每次添加%的新洁尔灭溶液；
每四周 清洗一次CO2培养箱，将托盘、水盘等拆卸，并用70%酒精对培养箱内部箱体及零件全部擦拭一遍；
每两周 用次***酸钠漂白水稀释液清洗实验室地面；
平时应随手用酒精擦拭桌面，保证桌面整洁。水浴锅内应及时添加或更换去离子水，视具体情况而定。
相关厂家联系方式
CO2气瓶：纯度规格三个九，千禧京城，，，气瓶1000元左右，有空瓶后可以充气，约二百元；
CO2维修保养：见培养箱箱体；
移液器与电动移液枪维修：北京龙跃伟逸科贸，，；
生物安全柜维修：青岛海尔特种电器有限公司，；
医用冰箱维修：青岛海尔特种电器有限公司，；
离心机：江苏省金坛市医疗仪器厂，，。
细胞间操作规范
实验操作必须更换实验区拖鞋，穿着白大褂，佩戴无菌手套，应勤用酒精对前臂及双手消毒；
CO2培养箱内部环境非常适宜微生物繁殖，故所有从外界拿入培养箱内的物品均需要用70%酒精提前擦拭消毒，在对培养箱操作之前务必对双手及前臂消毒；
所有将要使用或用过的试剂及容器 务必立即标注使用人的姓名首字母、日期、试剂名称或状态 以防其他实验人员混用或误认为是干净的无菌容器而造成污染；
一般情况下不允许 拿出生物安全柜内器械，若必须在安全柜外使用器械，则应在使用后经70%酒精仔细擦拭消毒后放回安全柜内；
安全柜的无菌气流由上自下吹过，并在操作台表面分成前后两股气流进入循环系统，故应尽可能避免不干净的物品（如双手、使用过的耗材等）出现在无菌物品上方，操作应尽量在安全柜中间部分进行，尤其不能置无菌耗材于前风幕与外界环境的交界处；
锥形瓶中的生物废液可在加入适量次***酸钠漂白液消毒后，倒入下水道中，洗净瓶体后加入厚约1cm的次***酸钠漂白液继续盛装生物废液。使用、污染过的生物耗材应置于次***酸钠漂白液消毒后再作为一般垃圾处理；
使用移液枪及电动移液器时应慢速、小心操作，避免液体接触枪体，若不慎接触，应立即用70%酒精擦拭消毒。对于电动移液器，过度吸取液体会堵塞器械管口，可能造成仪器失效，若更换枪体内过滤器后仍不能正常使用，需联系厂家维修；
实验结束后，清理废液烧杯，并用酒精擦拭安全柜台面，当电动移液器电量不足一半时，应及时充电，避免电池老化，开启紫外灯至少30分钟。务必仔细检查使用过的仪器、器材，确定离心机电源关闭，水浴锅锅盖改好，显微镜已关闭，最后应清理桌面，保持实验室整洁干净，垃圾桶快满时注意将垃圾带走并换上新的垃圾袋；
酒