油脂中脂肪酸含量测定.doc

实验四油脂中脂肪酸含量测定―――气相色谱法测定大豆油中脂肪酸成分一、目的与要求油脂是食品加工中重要的原料和辅料,也是食品的重要组分和营养成分。必需脂肪酸是维持人体生理活动的必要条件,人体所必需的脂肪酸一般取自食品用油,即食用油脂。气象色谱法测定油脂脂肪酸组分是现在最常用的方法,也是一些相关标准(如: GB/T17377 )规定应用的检测方法。甲酯化是分析动植物油脂脂肪酸成分的常用的前处理方法,也是常用的标准方法( GB/T 17376-199 8)。本实验要求了解气相色谱法测食用油脂肪酸组成的原理,掌握样品的前处理方法,学****食用油脂中脂肪酸组分的色谱分析技术。二、原理本实验甲酯化方法采用国标-- GB/T 17376-199 8,甘油酯皂化后,释出的脂肪酸在三***化硼存在下进行酯化,萃取得到脂肪酸甲酯用于气象色谱分析。样品中的脂肪酸(甘油酯)经过适当的前处理(甲酯化)后,进样,样品在汽化室被汽化,在一定的温度下,汽化的样品随载气通过色谱柱,由于样品中组分与固定相间相互用的强弱不同而被逐一分离,分离后的组分,到达检测器( detceter ) 时经检测口的相应处理(如 FID 的火焰离子化), 产生可检测的信号。根据色谱峰的保留时间定性,归一法确定不同脂肪酸的百分含量。三、仪器与试剂(一)仪器 :具氢火焰离子化检测器( FID )。 (二)试剂 :分析纯,沸程 60~90℃或30~60℃,重蒸。 ***化硼甲醇溶液 、实验步骤(一)样品预处理甲酯化: 取 2~4 滴大豆油样品于 xml 的圆底烧瓶中,加入 3 ml 的 KOH 甲醇溶液,70℃水浴加热回流 5min ;取出冷却至室温(可用水冷),加入 5ml 三***化硼溶液, 70℃水浴加热回流 5min ;取出冷却至室温,加入 3ml 正己烷, 70℃水浴加热回流 5min ; 取出冷却至室温, 加入适量饱和食盐水溶液,静止 3~5min ,取上层油样 1ml 于试样瓶中,进 GC 分析。测定: (1)气相色谱条件①色谱柱:石英弹性毛细管柱, (内径) ×60m ,内膜厚度 。②程序升温: 150 ℃保持 3min , 5℃/min 升温至 220 ℃,保持 10