大肠杆菌中特异β葡萄糖醛酸酶提取纯化研究.pdf

摘要
本论文以对硝基酚一葡萄糖醛酸昔为底物测定了大肠杆菌在不同培养
条件下的一葡萄糖醛酸酶一简称活性,确定了
的最优培养条件,并对进行了提取纯化和检测。
通过活性的测定,发现对于提高活性而言,不冻融优于冻融,
液体培养优于斜面培养,培养基配方优于配方优于配方小时振荡培
养优于天振荡培养。的最优培养条件为在配方中振荡培养小时。
配方的组成为蛋白脉,甘油磷酸钠
通过硫酸钱分级沉淀、凝胶过滤层析和磷酸钙吸附层析相结合的方法对
进行纯化。最终提纯倍数,回收率
采用聚丙烯酞胺凝胶电泳测定纯度及分子量,分离胶浓度
。粗提电泳凝胶经考马斯亮蓝染色后在和出现两条蛋
白带,碱性品红染色表明分子量为的亚基带具有糖链结构。纯化
在出现单一条带,为经变性电泳裂解的亚基。
关键词大肠杆菌一葡萄糖醛酸酶对硝基酚一一葡萄糖醛酸普提取
纯化
一


一

曲

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一
天津科技大学顿学位论文
前言
食品安全一直是世界各国倍感困惑和棘手的重要问题。安全本意为没有
危险,不受威胁,不出事故。我们所说的食品安全的概念为食品应当无毒
无害,不能对人体造成任何危害。也就是说食品必须保证不致人患急慢性疾
病或者具有潜在危害
早在年,联合国粮食和农业组织及世界卫生组织的食
品安全专家委员会在它的报告“食品安全对健康和发展的作用”中指出污
染食物引起的疾病是对人类的健康最常见的威胁之一,也是经济生产力削弱
的一个重要原因。防止食品污染、保证食品安全、维护消费者的健康和权益
己成为各国的一件重要国策
尽管现代科技已发展到了相当水平,但食源性疾病不论在发达国家还是
发展中国家,都没有得到有效的控制,仍然严重地危害着人民的健康,成为
当今世界各国最关注的卫生问题之一川。
造成食品安全的隐患极为广泛和复杂,主要有生物性污染和化学性污染,
其中生物性污染包括细菌性污染、真菌毒素污染、病毒性污染和寄生虫,化
学性污染包括重金属污染、农药污染及其他化学污染
国内外食品安全现状
国外食品安全现状
近年来不断发生与食品安全有关的食品污染事件,造成了人们对食品污
染的恐惧和对食品安全的担心。以下是近年来国外发生的影响较大的食品安
全恶性事件
美国食品的李斯特菌污染问题
美国是世界上食品安全管理最严格的国家,有着各种法律法规控制着食
品的安全与卫生,且国民素质高,各种加工消毒技术完善,但食物中毒事件
仍呈上升趋势。
年年底,美国发生了历史上因食用带有李斯特菌的食品而引发的最
严重的食物中毒事件。据美国疾病控制中心的资料,在美国密歇根州,有
人因食用被该菌污染了的“热狗”和熟肉而死亡,在另外个州也有人因
此患病,名妇女因此流产。
英国的“疯牛病”事件
年发生的英国“疯牛病”事件是人类史上首次危及全球人类健康的
重大食品安全事件。一场英国“疯牛病”风波震撼全球,引起了全世界的恐
,使许多消费者谈“牛”色变。
“疯牛病”属人畜共患传染病。该病是由一种尚不清楚的病毒引起的,
目前尚无有效的防治办法。年,英国阿什福德的一个农场首次发现“疯
前言
牛病”,年来英国已有万头牛患此病死亡。年,英国开始有人患了
与“疯午病”症状类似的克一雅氏病。这种病的潜伏期长达年,发病
前无法诊断,发病后又无法救治,死亡率几乎为。由于此病潜伏期长,
据估计本世纪将进入发病高峰期,死亡人数每年将至少有人
比利时的“几一恶英污染食品”事件
年月在比利时发生的“二恶英污染食品”事件是继英国“疯牛病”
之后,发生在欧洲的又一起对人类健康造成威胁的恶性事件。
年月,比利时一些养鸡场出现鸡不生蛋、肉鸡生长异常等现象,
遂怀疑饲料有问题。经调查发现这是由于比利时家饲料公司生产的饲料
中含有致癌物质二恶英所致。其中一家饲料厂的饲料用脂肪的二恶英含量超
过允许限量倍以上。买走这批饲料的养殖场超过家,包括比利时的
多家养鸡厂、家养牛场和余家养猪场,这批饲料也已售往德国、
法国、荷兰等国
日本的“”事件
年月下旬以来,日本冈山、厂一岛、爱知、福冈等县的几十所中学
和幼儿院相继发生起集体食物中毒事件,中毒人数多达人,导致名
儿章死亡,多人入院治疗。到月底。累计中毒人数超过万人,死亡
人,波及个都府县的暴发性食物中毒事件,引起全世界的极大关注
据有关部门检测,引起食物中毒的是一种名为的病原性大肠
杆菌。是引起食物中毒的病原性大肠杆菌中最危险的一种,这种病
菌一般寄生在牛羊等动物的肠道内以及土壤和污水中,通过食物进入人体后
在肠壁上繁殖,并产生一种毒素。现在医学上通常使用的抗菌