菠菜种子胰蛋白酶抑制剂分离纯化与性质研究.pdf

四川大学
硕士学位论文
菠菜种子胰蛋白酶抑制剂分离纯化与性质研究
姓名:康庄
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:杜林方
20050510
菠菜种子胰蛋囱酶抑制剂的分离纯化与性质研究摘要进一步利用一纤维素离子交换柱层析,胰蛋白酶擞辏纯学与分子生物学专鼗耢究生:褒痊撂撰教炳:毒土昧方教授蛋白酶抑制剂是一类能选择性地降低靶蛋白酶活性的小分子量蛋白质。植物蛋白酶抑制剂参与了植物内源性蛋白酶活力的调节、植物贮藏蛋白的运输、保护植物免受真菌和昆虫的侵蚀,作为抗虫因子,已广泛地应用于抗虫转基因植种子研磨粉碎后,经过***脱的硫酸抽提、’缺湫猿拥鞍住ケズ投攘蛩犸Х植垦析等步骤,得到抑制剂粗提物。葡聚糖凝胶过滤,最后从粗提液中分离纯化得到其中的胰蛋白酶抑制剂利用蛋白质内源荧光检测在不同溶液中的构象变化。当激发光波长为物的选育。而且蛋白酶抑制剂作为新型药物在癌症、艾滋病等疾病的治疗方面具有应用价值。我们从菠菜种子中分离纯化得到胰蛋白酶抑制剂,对其进行了部分性质研究。藜科菠菜属植物菠菜脂、以及。狿治銎浣品钟枇课5鹊缇劢故笛橄允酒涞鹊绲为H任榷ㄐ允笛橄允維℃水浴条件梢员3植糠值囊种苹钚裕具有极高的热稳定性。叫川大学硕士学位论文
,掇辩锏纳蛋彼岱⑤氪姑溉玷ダ兑疲宸醣孤人岵邪举萦诘绑话ǚ肿彗鄉辩,天然豹最大发射渡长为搿疞酝豢处理瑟,最大发射峰发生红移,荧光强度降低。/账犭掖Σ泻螅畲蠓⑻鸩ǔし⑸辍暌疲荧光强度降低。经疞二硫苏糖醇处理后,同样也出现段大发射峰红移,理轰,摄在发麓邃发熏红移,荧光强疫降蘸。荧必分撰表鞠:二蠛键、穗东俘用、范德牮力、氢键和静电作用在维持高级结构方面麓潜重要的作用。抑制动力学实验证明:为单头抑制剂,抑制类型为竞争性抑制,抑制簸大啜收,裁嘲中禽芳香族氨蓦酸残基。荧光强痰降低。当激发光波长为时,天然的最大发射波长为的内部。/蛩卮砗螅畲蠓⑸浞宸⑸兑疲ü馇慷冉档汀疘.。盐酸胍处理后,最大发射峰发生红移。荧光强度降低。而疞■硫苏糖醇处常数远小予胰蛋白酶的反应常数,蹙一种挪制活力缀强的抑制剡。其有美键溺:菠菜簇爨密酶据割裁分离与缝毒禾遣貌冒趿ρвü馀心川大学顾士学位论义
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弓百种,主舞分布在豆科”讣,禾本科叫,葫芦科⋯“戎参镏校只ǹ谱嵋胰溅臼酶抑制剂***捍嬖谟诙参锖臀⑸镏校褐各挂鹊鞍酌敢种鑫体内诲多重要熬叟禽活动。簇蛋舞酶蘩裁裁爨旁广泛豹生物瀵毪窝终惹,对『‘急性胰艨炎,肺气肿,出血性和败血性休克锋疾病有独特的疗效,植物来源的胰蛋白酶抑制剂还有抗某砦病虫密的天然防御功能,能削弱或者阻断昆呶消化道内懿摄自酶对植物蛋自曩的消化作用蔼使鼠基嚣正常发裔或者死亡。褥簌蛋白酶醴迷谥参镏泄惴捍嬖冢匚桃丫檠锏靶隔φ〔镁惨丫猩有不少报遂K裕罢腋康母行У囊壬ё悦敢种萍辆拖缘靡庖宸浅根据热薴的分类原则可以将植物的蛋白酶抑制剂分为丝***酸类蛋白酶抑制剂、巯基缀白酶抑制剂、会属蛋白酶抑制剂。在横物中无动物中存在的酸性蛋自酶捧割铡。根据分予熬、二磙键、对热及交性毽子豹抗蛙接物中酾馥***酸类蛋自酶抑潮潮可分为瓸耱炎型生命科学研究的一个热点。近年来,蛋自酶抑制铷已从结构、生物学功能及分子调控方溪褥到了深入貌疆究””5白悦妇卜床斡朕桨魈倒鐾暗好镐的凋节、植物贮藏蛋囱的运输、保护植物免受豢菌和昆虫的侵蚀。蛋白酶抑制制本身邂与动物体内诸多生理生化反应,比如瓶液凝固、胂瘸细胞生长分化,芟滋病瘸毒弱传染等窍密切豹关系。蛋白酶薹臻剃剡非常适合予研究蛋白蒺分子闽盼稠曩作用、蛋自璇络构与功能关系。已经存多种蛋白酶辩潮裁与猪胰瓣囱酶复合物的晶体结构被测定,比如绿豆胰蛋白酶抑制剂与胰鬣臼酶复合物的兰方晶体和四方晶体已经测定褂小蠢鑫酶掺露冒狙鄘搴缀鞠己被嚣毫,院菊毒:蠢避ゲ貌媚怠保’￡抑制荆,大豆抑制剂疲潭挂种破攵蕂=Π酌敢种萍磷魑P滦鸵┪锖呈地了巨大的应用价值,在癌症、艾滋病等疾病的治疗方面也取得重大发现。蛋白酶抑制魏穆为撬虫因子,已广泛蟪盛雳予抗囊转基因揍物驹磷究,著璺照有ψ拥白悦敢种品υ诙锾迥诒泶锏难芯勘ǖ纅作用的多肽或者蛋白质,能与相应的蛋白水解酶形成一定的动态平衡,调节生重大。由于蛋白酶抑制剂在基础及应用研究具有莺鞭价值和潜力,使其成为近年束网川火学顺上学位沧盘俊
牧霞椒椒材料与仪器方法^辣绮げ耸簟ǘ晟”竞成2げ瞬骐2薇,俗称纽嘴绿鹦哥。原产尼泊尔,根据《唐书》及《詹会簧》等史书记藏,唐太宗贞观年年崞怕薰跖汕彩拐呷胩圃筒ゑ锊说任铩8的屈婆罗国就在今天的尼泊尔境内。它有缀高的营养价值,特铡是对于儿爨的俊食,没有澍静东西黥代骜它。菠蘩睬营、蘸,熬有养盘壹藏,敛阴润燥之功效。故邋用于高血压、糖尿病、肺痨、胃肠功能失调、慢性便秘