鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化大鼠肝组织HGF表达的影响.pdf

仲景医学求真(续四) 392 鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化大鼠肝组织 HGF 表达的影响李志毅谢世平?(河南中医学院郑州 450008 ) 摘要: 目的:观察鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化模型大鼠肝组织 HGF 表达的影响,分析鳖甲煎丸抗肝纤维化的治疗作用并探讨其作用机制;通过与抗肝纤维化药物秋水仙碱对照, 为临床防治肝纤维化用药提供科学依据。方法:雄性 Wistar 大鼠 90 只,随机分为 6组:正常对照组、模型对照组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎丸预防组、鳖甲煎丸治疗组,选用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型。各组于 10 周后随机取 8只大鼠断头处死, 取肝组织,免疫组化染色,用图像分析法检测 HGF 。结果:鳖甲煎丸能够抑制肝脏纤维化病理改变,明显增加 HGF 的表达。结论:鳖甲煎丸具有明显的抗肝纤维化作用。肝细胞生长因子( hepatocyte growth factor , HGF )又称扩散因子,是目前已知最强烈的肝细胞增殖刺激因子,肝再生时 HGF 可能是启动肝细胞增殖的主要信号。研究认为 HGF 可抑制肝细胞的损害,具有抑制肝纤维化( Hepatic Fibrosis , HF )的作用,其机制可能是 HGF 直接作用于肝星状细胞( hepatic stellate cell , HSC ),抑制其活化。在肝组织, HGF 可以逆转肝纤维化、诱导新血管形成、促进肝组织细胞再生,但对其作用机制的了解尚不充分。笔者应用猪血清诱导的免疫性肝纤维化模型进行研究, 运用免疫组织化学技术和病理形态计量分析法检测模型大鼠肝组织中 HGF 含量,观察其在肝纤维化过程中的影响,通过中药鳖甲煎丸进行预防性和治疗性干预, 研究该药对 HGF 的影响以和抗肝纤维化作用及机理, 现报告如下。 1 材料和方法 材料雄性 Wistar 大鼠 90 只,体重 180~200g ,由河南省实验动物中心提供,随机分为 6 组: 正常对照组、病理模型对照组、鳖甲煎丸预防组、鳖甲煎丸治疗组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组,每组 15 只。鳖甲煎丸由杭州胡庆余堂制药厂生产,批号 01041203 ;秋水仙碱片由西双版纳制药厂生产, 批号 010218 。未灭活猪血清购自郑州佰安生物工程公司, 抗 HGF 、 SABC 免疫组化染色试剂盒、 DAB 显色试剂盒购自武汉博士德公司。 HPLAS-1000 计算机彩色病理图文分析系统( 版)由同济大学千屏影像有限公司设计,河南省中医院病理室提供。 方法 造模与给药?谢世平,女, 1955 年生,河南杞县人,博士,教授,博士生导师, xspzz@ , (0371)65926508 。实验研究 393 选用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型。除正常对照组外,其余各组均采用未灭活猪血清腹腔注射, / 只,每周 2次,连续 10 周。各预防组于造模同时给药,每天上午灌胃 1 次,鳖甲煎丸预防组给予鳖甲煎丸混悬液 ,秋水仙碱预防组给予秋水仙碱混悬液 ,连续 10 周。各治疗组于造模第 6周给药,方法及剂量同预防组,至第 10 周结束。 取材各组均于造模 10 周结束后随机取 8 只大鼠断头处死,采血制血清。同时取 ××