离体蛙心灌流及某些离子.ppt

离体蛙心灌流及某些离子
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主要内容
相关理论知识
实验部分
实验目的
实验对象
实验仪器与药品
实验步骤
结果分析与讨论
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相关理论知识
正常的蛙心能按等效应。
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实验目的
。
：
① K+、Ca2+
② 酸、碱度
③ 肾上腺素（E）
乙酰胆碱（Ach）
对心脏活动的影响
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实验对象 蟾蜍
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实验仪器设备
RM6240生物采集系统
张力换能器
蛙类手术器械
蛙心插管
试管夹
缝合线
蛙心夹
铁支架
滴管
实验药品
任氏液
l％KCl
3％CaC12
l：10,000 E
l：10,000 ACh
3％乳酸
％NaHCO3
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实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备


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一、离体蟾蜍心脏标本制备
实验步骤
（腹面）
（背面）
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实验步骤一、离体蟾蜍心脏标本制备

在主A干下穿一线打一松结；在左主A下再穿一线结扎。
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实验步骤一、离体蟾蜍心脏标本制备

在主动脉根部剪一
斜口，将插管插入动脉
圆锥， 在心室收缩时
将插管插入心室，结扎
固定。
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在铁支架上

架支台上，在心室舒张期
将与换能器相连的蛙心夹
夹在心尖上。
实验步骤
二、连接仪器和装置
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注意事项
，每次换液时，必须用任氏液冲洗3次。
，心搏曲线出现变化后立即将插管内液体吸出。
。
。
,以免影响实验结果。
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观察项目
一、描记正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的程度
曲线疏密 —— 心率
曲线基线 —— 舒张的程度
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二、观察离子、药物和酸碱的影响1)更换任氏液为3%***化钙溶液1～2滴，记录心率和收缩幅度，冲洗（下同）2)滴加1～2滴1%***化钾溶液3)滴加1～2滴1：10000去甲肾上腺素溶液4)滴加1～2滴1：10000肾上腺素溶液5)滴加1～2滴1：10000 乙酰胆碱溶液6)滴加1～2滴 %碳酸氢钠溶液7)滴加1～2滴3%乳酸溶液
观察项目
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实验结果
实验项目
收缩强度
心率
处理前
处理后
处理前
处理后
任氏液
2% CaCl2
1% KCl
1：10000 E
1：10000 Ach
% NaHCO3
3% 乳酸
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结果分析与讨论
：正常对照
2. 3%CaCl2灌流：
[Ca2+ ]o ↑
Ca2+内流↑
[Ca2+]i↑
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
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结果分析与讨论
3. 1%KCl灌流：
[K+ ]o↑
AP平台期缩短
Ca2+内流↓
兴奋-收缩耦联↓
收缩力↓
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结果分析与讨论
4. 1:10000 E灌流
4期 If 、I CaT通道↑
4期自动去极速度↑
自律性↑
心率↑
与心肌β1受体结合
Ca2+内流↑
肌浆网释放Ca2+↑
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
cAMP
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结果分析与讨论
5. 1:10000 Ach灌流
与心肌M受体结合
K+外流↑, Ca2+内流↓
E-C耦联↓
收缩力↓
最大复极电位↑
4期K+外流↑
自律性↓
心率↓
[Ca2+]i↓
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碳酸氢钠 乳酸
结果分析与讨论
6. ％NaHCO3 灌流
中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结
合，心肌收缩力恢复。
7. 3%