Aβ-%2c25-35-对海马神经元毒性作用的实验研究.pdf

吲、等体积培养液孵育小时进行预处理,在培养第旌免疫组化染色显示蚆能干预骸#罩潞B硐赴蛲觥I倏峁貉凹且浼觳饨峁允荆汉#骸W⑸浜欤笛樽榈谋馨登狈诮隙将培养的海马细胞作为对照组,加入坤J笛樽椋蠬荧光染色。注射后天的海马组织和经:。孵育的体外培养海马细胞均出现典型的凋将培养旌蟮暮B硐赴治组,分别加入神经生长因子,/榫尤階。/缓缶蠱检测和免疫组化检测照组缩短,避暗错次较对照组显著增加.。透射电镜察见。。,亡征象,凋亡细胞的核染色质呈境界清晰的聚集状固缩、块状凝聚或星月形小体蛲鲂√,而细胞膜及胞浆中的线粒体等细胞器形态和结构保存完好。对照组均未见细胞凋亡。在单克隆抗【、庖咦榛拖赴旧上,实验组均可见明显棕褐色着染的和粜韵赴约皊过度表达,而对照组大鼠海马和培养细胞上均未见免疫阳性细胞。觳夂结论:在体和离体实验均表明。。可诱导海马神经细胞发生凋亡;蛋白可能参与了上述神经细胞的凋亡机制;细胞因子在此过程中高度表达;蚆能抑制的神经毒性作用。/
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头旁龆嗪或粱飨栽黾油#荈和言引近年来,的分子遗传学取得了很大的进展。大量研究表明㈣,的发————————————’———————!猒!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!R弧!胞凋亡‘弧埃庵窒赴蛲隹赡苁峭ü谎趸!辭蚇趴赝ǖ兰せ阿尔茨海默病’珹是一种常见的老年期神经系统变性疾病,临床表现为进行性认知功能障碍和神经精神异常,病理变化主要发生在前脑基底、海马和大脑皮层的神经元丧失、神经纤维缠结、老年斑瑂和神经元空泡样变。姆⒉』颇壳吧形疵髁恕生与脑内多种调控基因的失调密切相关,目前分予遗传学研究发现某些家族性的致病基因和危险因素,共有三种致病基因和两种易感基因,这些相关基因,包括:湃旧宓目谝坏矸垩疤宓鞍產,基因;湃旧宓脑缋系鞍滓基因.;号染色体的早老蛋白基因口湃旧宓脑刂鞍譋基因号染色体的颉5ǘ杂谡糀%以上的非家族性散发性,人们却无法合理、恰当地解释。,患者存在一个共同的病理性异常,即疉代谢通路的异常,在发病早期即可发现脑内矸垩鞍共同通路之一口嗄昀矗嗣侨鲜兜紸对神经元的毒性作用,但对其作用机制一直存有争论,近期研究表明,峭ü肷窬1砻媸芴褰岷希神经元内钙离子失衡,从而造成神经元的损伤的【俊募钢制瓵口。。、!#均可在体外诱导离体培养的细胞发生凋亡。应用,§,。在离体和在体的毒性作用研究已有许多报道口对体外培养的神经细胞及在体的神经细胞均有毒性作用,其作用依赖于多肽的聚集状态和蛋白的浓度皅,认为主要效应片段是:,。㈣。文献报道,赏üせ頒、甪、..、.幕虺绦蚶鲇盏枷可使胶质细胞谷氨酸载体功能发生障碍,造成谷氨酸过量聚集,受体持续澈活,大量”内流,增加突变的姆牒蠹庸こ葾佣加木奂痭俊H欢泄卣夥矫娴淖饔没粕形炊郏写徊窖芯俊病理资料证实,在脑内粱捌淞诮虼嬖诖罅恳斐;,珹
:。对大鼠学忆活动的影响,研究了。,离体和在体的致凋亡效应,以及蚆的保护作用,试图探讨:Ⅲ诱导海马神经细胞增生的小胶质细胞和星形胶质细胞,同时伴有白细胞介素..蕖、.、⒒撇斡階姆⒉』啤酪氨酸激痭巧窬ぴ白的功能性受体。胆碱乙酰转移酶珻是胆碱能神经递质乙酰胆碱合成的关键酶。太鼠发育过程中基底前脑表达有一定的规律,老龄鼠和早老性痴呆病人基底前脑、表达明显下调。八十年以后,人们发现灾惺嗌窬低持谢浊澳缘ḿ钅苌经元有作用。作用于该部胆碱能神经元的饕S砂星海马及新皮质经逆行运输到胆碱能神经元胞体,发挥其靶源性营养作用罅康难芯勘砻这类神经元亚群在学忆中具有特殊功能。本课题通过避暗法、采用透射电镜、⒘魇较赴恰⒚庖咦榛龋凋亡的作用机制,以便阐明粱階⒉』频南喙匦浴察了,、
毫亢胗盏即笫蠛B砩窬5蛲龅氖笛檠芯材料与方法第一部分广泛重视,在本实验中我们采用#ゲ嗪B矶ㄏ蛭⒆⑸浞椒ǎ捎猛干涞矸垩鞍奘抢夏臧闹饕3煞郑诎⒍ずD⒉』制中具有关键作用。近年来,应用直接脑内注射建立模型的方法受到镜及和泶锏拿庖咦榛ǎ鄄霢骸#院B砩窬5闹碌亡效应。此外,我们研究了和:。;两者在发病机制中的联系。笛槎普通级大鼠只鹤灾泄蒲г荷虾J笛槎镏心坌裕逯±,常规环境饲养。饕R瞧骱蜕璞多用光控条件逃避反射仪中国中医研究院中药研究所脑立体定向仪上海第二军医大学器材厂⒘拷上海医用激光仪器厂单克隆抗体公司タ寺】固錎免疫组化染色试剂盒公司透射式电子显微镜瑀日本质醴椒只大鼠随机分成椋孔閘唬碅碜实验组⑸硌嗡组哉兆。在手术实验前随机给予避暗法训练,训练结束后予以右侧海马定向注射。。.于实验前用双蒸水稀释成/,贮于冰箱备用。大鼠”
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