版中国药典培训课件(湖南)-版药典附录无菌检查和微生物.ppt

2010年版药典附录无菌检查和微生物限度检查方法增修定内容
一：新增微生物限度检查法指导原则
四、药品微生物试验室规范指导原则
二：2010年版无菌检查法增修订内容
三：微生物限度检查增修定内容
四：新增微生物限度检查法指导原则
一、体石蜡覆盖保藏法，用于菌种的传代，。甘油冷冻管保藏法一般可保存2年；
甘油冷冻管保存法
甘油冷冻管保存法适用于保存传代用菌种，一般可保存2年。 ①将待保存用菌种接种至平板或琼脂斜面，经37℃24～48h培育后，用无菌接种环轻轻刮 取菌苔，移至预先装有无菌蒸馏水的试管中，调整菌液浓度，使其等同于1单位麦氏比浊管。 ②向已制备好的菌悬液中加入等体积，浓度为20%的无菌甘油，得到10%甘油菌悬液。 ③轻轻振摇，使10%甘油菌悬液充分混合，分装于无菌小试管中，在-30℃条件下贮存。
工作菌种
： 工作菌株不行代替标准菌株，标准菌株的商业衍生物仅可用作工作菌株
保存于半固体内或琼脂斜面培育基中，作为工作用菌种，用符号W表示。一般可保存1～2个月。严格限制传代次数，工作菌种不超过五代，
冻干菌种→养分肉汤→半固体琼脂或甘油水100支冰箱保存（原代）（一代）（二代）
⒋菌种的管理
严格的程序化管理
试验室必需建立菌种保存和运用文件的程序管理制度
菌种的销毁
1方法：菌种销毁接受高压蒸汽灭菌：121℃，20分钟。 2需刚好销毁处理菌种：①发生污染或变异的菌种；②超过保存期限的菌种；③运用后的菌种。
⒌试验室的布局和运行
⑴试验室布局设计的基本原则
　①具有检测所需的适宜、充分的设施条件。
　②合理的布局与设计，具有独立的试验室、
　　协助区域各区域应有明确标识。
　　③建立限制程序和标准操作规程。
⒍建立合理的限制程序和标准操作规范
⑴对进出干净区域的人和物建立限制程序和标准操作规程。
　⑵ 消毒剂的配制应按标准操作规程配制，对所用的消毒剂种类应定期更换，运用的消毒剂应无菌。
⑶建立检样品传递、储存、处置和识别管理程序。
⑷建立带菌培育物溢出的意外事务制定处理规程。
⑸建立合理的取样限制程序和标准操作规范。
⒎设 备
试验室应配备与检验实力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和精确度等级应满足检验所接受标准的要求，设备的安装和布局应便于操作，易于维护、清洁和校准。运用的消毒剂应无菌。
　建立相应的操作和维护和保养的标准操作规程。
⒏文件
文件应当充分表明试验是在试验室里按可控的检查法进行的，一般包括以下方面：质量管理文件、程序文件、技术操作文件。
⒐试验记录的保存
试验结果牢靠性的依靠于试验严格依据标准操作规程进行，包括正确的试验操作、试验记录、(全部关键的试验细微环节)，以便确认数据的完整性。
⒑结果的推断
由于微生物试验的特殊性，在试验结果分析时，应从各个可能的方面去考虑，不但要假设被污染，而且要考虑微生物在原料、辅料或试验环境中存活的可能性。此外，还应考虑微生物生长特性。
⑷假如依据分析调查结果发觉试验有错误而判试验结果无效，那么这种状况必需记录。试验室也必需认可复试程序，假如须要，可按相关规定重新抽样，但抽样方法不能影响不符合规定结果的分析调查。
二：2010年版无菌检查法增修订内容
一、进一步确定了无菌检查法的定义：
无菌检查法系用于检查要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料、及其他品种是否无菌的一种方法。
二、进一步明确了无菌检查保障
1、检验全过程必需严格遵守无菌操作，防止再污染 ，但接受的措施不得影响微生物的生长。
2 、无菌检查要进行环境检测增加了日常检验还需进行环境检测。
2、无菌检查人员必需具备微生物专业学问，并经过无菌技术的培训。
三、培育基增修订内容
⒈删去硫乙醇酸盐流体培育基和改良马丁培育基的运用范围(用于培育好氧菌、厌氧菌及用于培育真菌) 　
⒉删去选择性培育基运用的表面活性剂种类对氨基苯甲酸、聚山梨酯-80等。
理由 阅历证试验选择适宜的中和剂、灭活剂和表面活性剂
培育基适用性检查增修订内容3、培育基灵敏度试验 ⑴删除 菌悬液制备中黑曲霉菌悬液的制备 “（用管口带有薄的无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细吸管）” 修改为“用适宜的方法吸出孢子悬液”。 ⑵%无菌***％v/v）聚山梨酯80。
四、试验稀释液、冲洗液增修订为
⒈ 增加依据供试品的特性，可选用其他阅历证过的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液。
⒉试验中运用的中和剂、灭活剂和表面活性剂除证明其有效性外还应证明对污