第三章生物药物的微生物限度检查NO.ppt

第三章生物药物的微生物限度检查NO
操作环境
微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检查全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工第三章生物药物的微生物限度检查NO
操作环境
微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检查全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净验证。
培养温度和时间
本检查法中细菌培养温度为30~35ºC；时间为48小时。霉菌、酵母菌培养温度为23~28 ºC；时间为72小时。控制菌培养温度为35~37 ºC；时间为48小时。
眼用制剂微生物限度检查用薄膜过滤法，培养时间为7天。
三 微生物限度检查步骤


①、常规法
②、稀释法
③、离心沉淀集菌法
④、薄膜过滤法
⑤、中和法
⑥、离心和培养基稀释法
⑦、离心和薄膜过滤法
微生物限度检查常用检验设备及器材
恒温培养箱 30～35℃ 36±1℃
霉菌培养箱 25～28℃
恒温水浴箱 45±1℃
净化工作台 生物显微镜 1500X
体视显微镜或放大镜 电冰箱
电热干燥箱 250～300℃
高压蒸汽消毒器
电子天平或药物天平
匀浆仪或研钵
锥形瓶 100ml，250ml，500ml，1000ml
直形吸管 1ml，10ml
量杯 10ml
试管 18x180mm，13x200mm，30x200mm
试管筒 培养皿 9cm
培养皿筒 陶瓦盖 12cm
量筒 100ml，500ml，1000ml
滤器及微孔滤膜 ±
注射器 1ml，5ml，10ml，30ml
载玻片及盖玻片
接种针及接种环
试管架
乙醇灯 康氏振荡器
离心机 500～4000／min 紫外灯 365nm
玻璃或搪瓷消毒缸 （带盖）
大、小橡皮乳头
乙醇棉球或碘伏棉球
灭菌剪刀、镊子、钢锥
灭菌称样纸
灭菌不锈钢药匙
火柴、记号笔（玻璃铅笔）
白瓷盘、洗手盆
实验记录纸
1、含抑菌药物为什么会染菌？
2、如何确定含抑菌成分？
3、含抑菌成分供试液的制备方法有那些？
4．含抑菌成分供试品
凡含防腐剂或抑菌成分且影响检验（供试品按常规检查法，加入规定量的对照菌，不能检出时）的供试品，可根据供试品的性质，控制菌的特性及检验条件等按以下方法之一或两种以上方法联合应用处理后，依法检查。同时做阳性和阴性对照。
①稀释法： 将供试品种入较大量的培养基中，使该供试液稀释至不具抑菌作用的浓度（使该供试液稀释至阳性对照菌能生长的浓度）。此法用作控制菌检查和限度检查。
本法适用于抑菌作用不强的中药、化学药品的检验。
②离心沉淀集菌法： 取规定量的供试液于无菌刻度离心管中，离心（每分钟3000转）30分钟，弃去上清液，留底部集菌液约2ml，再稀释成原规定的供试液。如有不溶性药渣，可先离心（每分钟500转）5分钟，取全部上层液，再行集菌处理。
本法适用于一些抑菌作用不强的中、西药品，如蜜丸、水丸、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂及液体制剂。
③薄膜过滤法： 取规定量的供试液，置稀释剂100ml中，摇匀，以无菌操作加入装有直径约50mm、±，减压抽干后，用稀释剂冲洗滤膜3次，每次50～100ml，取出滤膜备