实验七薄层色谱.doc

有机化学实验九薄层色谱 1 实验九薄层色谱一. 实验目的: 1. 学****薄层层析的基本原理和分离鉴别有机化合物的操作方法。二. 实验仪器和药品: 主要实验仪器:数块显微载玻片 50m L 烧杯分液漏斗布氏漏斗研钵烘箱吸管玻璃板点样毛细管、大头针、直尺、玻棒主要化学试剂: 95% 乙醇石油醚( 60-90 0C) ***乙酸乙酯菠菜叶 % 羧***纡维素钠(CMC) 水溶液硅胶 G 三. 实验装置图: 四. 实验原理: 薄层色谱( thin layer chromatography ,缩写 TLC ) 薄层色谱又叫薄板层析,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术, 属固- 液吸附色谱, 它兼备了柱色谱和纸色谱的优点, 一方面适用于少量样品( 几到几微克, 甚至 微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外,薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。薄层层析法是一种微量快速的分析分离方法。它具有灵敏、快速准确等优点。薄层层析的原理和柱层析一样,属于固一液吸附层析的类型。通常是把吸附剂放在玻璃板上成为一个薄层,是为固定相,以有机溶剂作为流动相。实验时,把要分离的混合物滴在薄层析的一端,用适当的溶剂展开,当溶剂流经吸附剂时,由于各物质被吸附的强弱不同,就以不同的速率随着溶剂移动。展开一定时间后,让溶剂停止流动,混合物中各组分就停留在薄层析上显示出一个个色斑的色谱图。若各组分无色,可喷洒一定的显色剂使之显色。它是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能( 即分配) 的不同, 或其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组分分开。它是近年来发展起来的一种微量快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。有机化学实验九薄层色谱 2 最典型的薄层色谱法是在一块洗净干燥的玻璃片上均匀铺上一薄层吸附剂,制成薄层板。用毛细管将样品溶液点在起点处,把此薄层板置于盛有溶剂的容器中,待溶液到达前沿后取出, 晾干, 显色, 测定色斑的位置。由于层析是在薄层板上进行, 故称为薄层层析。记录原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离,计算此移值( R f): R f= 溶质的最高浓度中心至原点中心的距离/ 溶剂前沿至原点中心的距离混合物中各物质在薄析上随溶剂移动的相对距离称为比移值( R f值)。在一定条件下,各物质具有一定的 R f 值。不同物质在相同条件下,具有不同的 R f值。因此, 可利用 R f 值对物质进行定性鉴定。但物质的 R f 值常因吸附剂的种类和活性, 薄层的厚度,展开剂及温度等的不同而异。所以在鉴定的样品时,常用已知成分作对照试验,在同一个薄层板上进行层析,然后通过 R f 值的比较,对物质作定性鉴定。根据斑点的面积大小和颜色的深浅的标准物的对照下还可进行定量。五. 实验內容及步骤: 1. 菠菜色素的提取: 称取 10g 洗净后, 用滤纸吸干的新鲜的菠菜叶, 用剪刀剪碎并与 20m L 乙醇及 5-10ml ***拌匀, 在研钵中研磨约 5 -10 min , 然后用布氏漏斗抽滤菠菜叶, 弃去滤渣。将菠菜汁倒入分液漏斗, 加入 10ml 石油醚振动至分层( 如分层不明显可