大蒜素对三种农作物病原真菌的抑制作用-大蒜素胶囊的功效和作用.docx

大蒜素对三种农作物病原真菌的克制作用|大蒜素胶囊的功能和作用

　　摘要：采用水浸提法和乙醇萃取法制备大蒜素，对稻瘟病菌、小麦纹枯病菌、油菜菌核病菌进行体外克制实验，成果表白，水浸提法制备的２０ ｍｇ／ｍＬ大蒜素对３种真菌的抑菌效果分瘟病菌、小麦纹枯病菌、油菜菌核病菌由华中农业大学植物科学技术学院姜道宏专家惠赠。
　　马铃薯葡萄糖琼脂培养基配方为：马铃薯２００ ｇ，葡萄糖２０ ｇ，琼脂１５～２０ ｇ，水
　　１ ０００ ｍＬ，ｐＨ自然。
　　先将病原真菌移植到PDA培养基上于２７ ℃恒温活化５ ｄ，再转管培养８ ｄ备用。
　　１．２水浸提法制备大蒜素
　　大蒜头去皮、洗净、捣碎，酶解３０ ｍｉｎ，加蒸馏水于３５℃恒温水浴中浸提４０ ｍｉｎ，纱布过滤，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ，上清液经滤纸过滤后再用０．２ μｍ微孔滤膜过滤，可得到质量浓度为２ ｇ／ｍＬ的无菌大蒜素原液。
　　１．３乙醇萃取法制备大蒜素
　　大蒜头去皮、洗净、捣碎，酶解３０ ｍｉｎ，按料液比１∶４的比例加入９５％乙醇，在３５ ℃恒温水浴中萃取９０ ｍｉｎ，纱布过滤，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ。上清液用旋转蒸发仪减压浓缩３０ ｍｉｎ，条件为温度４２ ℃，压力０．０１５ ＭＰａ，转速７５ ｒ／ｍｉｎ。旋转蒸发除去乙醇的馏出液先经滤纸过滤，再用０．２ μｍ微孔滤膜过滤，可得到２ ｇ／ｍＬ无菌大蒜素原液。
　　１．４生长速率法抑菌测定
　　由于植物病原真菌生长较细菌慢，测定大蒜提取液对植物病原真菌的抑菌效果一般采用生长速率法［６］。PDA培养基灭菌冷却至４５ ℃左右，向其中加入适量２ ｇ／ｍＬ无菌大蒜素原液，制成浓度为５、１０、２０ ｍｇ／ｍＬ的带药培养基平板。用打孔器在活化的病原菌菌落边沿取直径５ ｍｍ的菌饼，置于冷却后的带药培养基平板中央，２７ ℃恒温培养２～６ ｄ。测量菌落直径，按下述公式计算大蒜提取物的抑菌效果：
　　本文为全文原貌 未安装PDF浏览器顾客请先下载安装 原版全文　　抑菌效果＝／×１００％
　　２成果和分析
　　２．１大蒜提取液对稻瘟病菌的克制作用
　　由表１可以看出，大蒜提取液对稻瘟病菌有克制作用，浓度越大，抑菌效果越强，水浸提法制备的２０ ｍｇ／ｍＬ大蒜素的抑菌效果最高可达到７０．６％，而乙醇萃取法制备的２０ ｍｇ／ｍＬ大蒜素的抑菌效果最高可达到７９．７％，阐明乙醇萃取法较水浸提法制备的大蒜素的抑菌成分多。随着培养时间的延长，抑菌效果逐渐削弱，也许和含大蒜素培养基中的抑菌成分逐渐挥发有关。在大蒜提取液供试浓度梯度设立有限的状况下，本实验中大蒜素对稻瘟病菌的最低抑菌浓度是５ ｍｇ／ｍＬ，抑菌效果达到２９．０％。
　　２．２大蒜提取液对小麦纹枯病菌的克制作用
　　从表２中可以看出，大蒜提取液对小麦纹枯病菌有克制作用，浓度越大，抑菌效果越强，水浸提法制备的２０ ｍｇ／ｍＬ大蒜素的最高抑菌效果可达到８３．６％，最低抑菌浓度的抑菌效果可达到６１．０％；而乙醇萃取法制备的２０ ｍｇ／ｍＬ大蒜素的抑菌效果达到８９．７％，显示大蒜提取液对小麦纹枯病菌的克制作用较对稻瘟病菌的克制作用强。
　　２．３大蒜提取液对油菜菌核病菌的克制作用
　　从表３中可以看出，大蒜提取液对油菜菌核病菌有克制作用，浓度越大，抑菌效果越