一个大豆ERF转录因子的克隆与表达分析 Cloning and expression analysis of an ERF transcription factor in soybean.pdf

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一个大豆B家蜃拥目寺∮氡泶锓治张大勇砹幔捉鹦停煺甄妗,何晓兰跸齦,黄益甜,媪砗柘矿删—础Ⅲ,矿妇出蚒ㄎ☆酱。/;】目Ⅺ:啪通讯作者:易金鑫,脚矧〡牛.∞张大勇,许玲,易金鑫,∮,,..江苏省农业科学院农业生物技术研究所,江苏省农业生物学重点实验室,江苏南京;暇┡┮荡笱┭г海苏南京;瓺摘要:利用—椒ù泳垡叶处理的大豆根部组织中克隆了龃蠖挂蚁┫煊σ蜃基因,由于其位于大豆基因组第旧迳希拭狦蜃狦。序列分析结果表明:该基因含有长的内含子,开放阅读框,ü被嵝蛄斜榷苑⑾郑眯蛄杏肫渌镏諩类蛋白质氨基酸序列有很高的相似性;聚类分析结果表明,与苜蓿和蓖麻遗传距离最近,与拟南芥和葡萄遗传距离相对较远;半定量—治鼋峁表明该基因主要在大豆叶和豆荚中表达,而且在外源%聿煌奔浜螅没虻谋泶镌诟孔橹鸵镀组织都受到不同程度的诱导,暗示该基因可能对提高植物耐旱性具有一定作用;利用洋葱表皮细胞的亚细胞定位分析结果表明,该蛋白质位于细胞核内,当去除诵藕烹闹螅玫鞍字史植加谙赴げ课唬獗砻鞲玫鞍字试植物体内通过充当转录因子的作用来调节下游基因的表达;适时定量一分析结果证实,该基因在外源砗蟪氏窒认碌骱笊系饔窒陆档那魇疲砻鞲没蚴蹵的诱导,可能参与了览档闹参锟逆信号转导途径。关键词:大豆;乙烯响应因子槐泶锓治觯皇适倍中图分类号:.文献标识码:文章编号:畑琗证,.:—,.琀”,俊緄—琍錫。收稿日期:基金项目:国家自然科学基金项目;江苏省农业科技自主创新基金项目】;江苏省自然科学基金项目作者简介:张大勇校轿鞣谘羧耍┦浚硌芯吭保芯方向为植物抗逆功能基因组学。:.×’甌畁圮,現.:%.’痵.—餎。/;
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牧嫌敕椒覩×、×﹔┫煊υ<岷系鞍转录因子,参与了植物细胞发育、激素应答、抗病和抗生物与非生物逆境反应⋯,且在植物体内分布广泛,拟南芥和水稻中可能分别有个基因旧8美嗟鞍字屎谐ざ仍霭被岷系骺叵掠位虻淖B迹硪环矫孀魑V匾的调控因子参与植物抗逆信号转导引。如拟南芥调素基因等的表达,而且过表达该基因的转基因植株对多种病害的抗性提高。萂刁。从大豆中因的烟草对盐和干旱胁迫都有一定的耐性。姚乌兰等”τ肦甈结合技术从病原菌诱导的基因,该基因在病菌侵染下上调表达,可能参与了抗病反应;董娜等一’也从小麦中分离出鍪芪瓶莶菌、赤霉病菌诱导表达的颍撇馄淇能通过茉莉酸、乙烯信号途径介导小麦对纹枯病菌、赤霉病菌的防御反应。由于大豆全基因组测序工作已完成,序列也已公布,从中精选优质基因资源成为摆在大豆科研工作者面前一项刻不容缓的工作。鉴于当前逆境胁迫对作物生长发育的负面影响越来越严重,本研究从工程改良大豆抗逆性状提供重要的基因资源和理论为本实验室保存。—盒购自公司,试剂购自上海英俊生物用腹鹤訤公司,反转录试剂盒购于上海捷瑞生物工程有限公司,引物由上海英俊生物技术有限责任公司合成,纯化回收试剂盒购于荆渌镅剂购自上海皓嘉科技发展有限公司。时,分别进行砗虯处理。恚理:将幼苗根部浸入们逅碜魑6哉铡=ù砗的根和叶片组织冻于液氮中,保存在一℃冰箱中。对于组织表达分析的材料,于年夏天取大田中种植的大豆植株幼嫩根、茎、叶、花和豆荚组织,保存备用。样品在