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核酸的制备与鉴定项目报告
项目名称：核酸的制备与鉴定 班级：10食品
组员：柴鲜鲜，王锦，安艳松，蒋玉丹
项目实验时间：
核酸的提取
一 • 背景知识
•概念
核酸是由核苷酸聚合而成的生物大分子化合物，为生00mL水，棕色并保存溶液； 临用时将三种溶液和水按下列比例混合：
17%硫酸：%目酸铵：10%抗坏血酸：水=1： 1： 1： 2 (V/V)。
干酵母粉
4 •提取RNA具体步骤
称5g干酵母粉悬浮于30mL NaOH溶液中并在研钵中研 磨均匀。
悬浮液转入三角烧瓶，沸水浴加热30min,冷却，转入离心 管。3000转/分。
离心15分钟后，将上清慢慢倾入10mL酸性乙醇，边加边搅
动。
加毕，静置，待RNA沉淀完全后，3000r/min离心3min。弃 去上清液。
用95%乙醇洗涤沉淀两次。再用***洗涤沉淀一次后，用 ***将沉淀转移至布氏漏斗抽滤，沉淀在空气中干燥。
称量所得RNA粗品的重量。
5 • RNA组份鉴定
取2g提取的核酸，，沸水浴加热10分钟制 成水解液，然后进行组份鉴定。
•嘌吟碱：取水解液10mL加入过量浓氨水。 ***银溶液，观察有无嘌吟碱化合物沉淀。
•核糖：取水解液1mL，三***化铁浓盐溶液2mL和苔黑粉乙醇 溶液一滴。放沸水浴中加热10min .观察核糖是否变成绿色。
•磷酸：取水解液1mL，加定磷试剂1mL。在水浴中加热观察溶 液是否变成蓝色。
三•项目实施报告
1 •实验结果
有嘌吟碱银化合物沉淀
加热后，溶液变成绿色
加热溶液变蓝色，但颜色很淡，并有絮状物。
根据上述结论得出：提取出的物品是RNA，但不是很纯，里面有杂
质存在。
2•实验数据记录
编号
样品(g)
加热时间
(min)
提取的重量
(g)
1
10
30

3•实验问题
为什么用乙醇洗涤RNA?
为什么在鉴定磷酸时有蓝色絮状物出现，且溶液的颜色很
淡？
为什么RNA提取的数量这么少？
四・RNA的含量测定
1 •方法：紫外分光吸收法、地衣酚显色法
名称
优点
缺点
紫外分光吸收法
简单、快速、灵敏度
高
受蛋白质等的干扰影
响
地衣酚显色法
比较灵敏
反应的特异性较差
2•所用的器材与试剂
紫外分光光度计、烧杯、氢氧化钠
3•具体步骤
(1) ,%氢氧化钠溶液和1mL
蒸馏水溶解，调成糊状。
再加入40mL蒸馏水溶液稀释，放置待测。
4•实验结果
由于分光光度计出现事故，此次试验未能做完，没测出结果。
5•实验问题
(1)为什么要加入氢氧化钠？
五•项目实施中应用的理论知识
1 •核酸由碳、氢、氧、氮、磷5种元素组成。
2 •由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物 质之一。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内 核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。不同的核酸，其化学组成、核苷酸 排列顺序等不同。根据化学组成不同，核酸可分为核糖核酸，简称 RNA和脱氧核糖核酸，简称DNA。DNA是储存、复制和传递遗传信息 的主要物质基础，RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用，其中转移 核糖核酸，简称tRNA，起着携带和转移活化氨基酸的作用；信使核 糖核酸，简称mRNA，是合成蛋白质的模板；核糖体的核糖核酸，简 称rRNA，是细胞合成蛋白质的主要场所。
3•单个核苷酸是由含氮碱基、戊糖和磷酸三部分构成的。碱基 (base):构成核苷酸的碱基分为口票必(purine)和嘧啶〉(pyrimi-dine) 二类。前者主要指腺嘌吟(adenine，人)和鸟嘌吟(guanine, G)， DNA和RNA中均含有这二种碱基。后者主要指胞嘧啶(cytosine, C)
胸腺嘧啶（thymine, 丁）和尿嘧啶（uracil,U），胞口密啶存在于DNA
和RNA中，胸腺嘧啶只存在于DNA中，尿嘧啶则只存在于RNA中。
戊糖（五碳糖）：RNA中的戊糖是D —核糖（即在2号位上连接的是一 个羟基），DNA中的戊糖是D—2—脱氧核糖（即在2号位上只连一个 H）。D —核糖的C—2所连的羟基脱去氧就是D — 2脱氧核糖。戊糖C —1所连的羟基是与碱基形成糖苷键的基团，糖苷键的连接都是8 — 构型。
核苷（nucleoside）:由D—核糖或D—2脱氧核糖与口票吟或口密啶 通过糖苷键连接组成的化合物。核酸中的主要核苷有八种。
核苷酸（nucleotide）:核苷酸与磷酸残基构成的化合物，即核 苷的磷酸酯。核苷酸是核酸分子的结构单元。核酸分子中的磷酸酯键 是在