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热原的基本知识
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一、热原的概念、组成与性质
热原：是由微生物代谢产生的微量即能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。
大多数细菌都能产生热原，霉菌、酵母菌、真菌，甚至病毒也能产生热原。在产生热原的微生物中，基，但易被空气或含尘空气中的微生物污染。虽经蒸馏可将热原除去，但若操作不当或蒸馏设备结构不合理，水蒸气中带有细小的水滴则可将热原带入。
另外，注射用水储存不当或储存时间过长被微生物污染也可产生热原。
故注射用水应新鲜使用，多效蒸馏水机质量要好，环境应洁净。

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一些原辅料因包装损坏、受潮而污染微生物可产生热原。另外，用生物方法制备的药品如水解蛋白及中药提取物易带入致热物质。

、用具、管道和装置中带入
如未按GMP要求认真清洗处理，常易导致热原污染。
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如室内空气、环境、人员卫生条件达不到要求，操作时间过长、产品灭菌不及时或灭菌不合格等均会增加微生物的污染而产生热原。

，在储存中被污染
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临床使用的器具如输液器、注射针筒针头、配药器具等的污染会带入热原，中心配药室或临床科室配药过程，由于环境、操作、用品、混入的其他药品等因素的污染也可能带入热原。
（二）使用过程中的污染
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三、除去热原的方法
耐高温的注射器、针头或器皿，在洗涤干燥后，于250℃加热30分钟以上，可以破坏热原。

热原能溶于水但不挥发，因此制备注射用水时，需经蒸馏，纯化水中的热原可被除去。

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活性炭对热原有较强的吸附作用，同时有助滤、脱色作用，所以在注射剂中使用较广。%~%，但应注意吸附可能造成主药的损失。
此外，还可用活性炭与白陶土合用除去热原。

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玻璃、搪瓷等耐酸容器及用具，可用***钾硫酸清洁液或稀氢氧化钠液处理破坏热原。

临床使用的一次性注射器、输液器都普遍使用该方法，效果可靠、产品具有较长的有效期。

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热原分子量为1×106左右，采用二乙氨基乙基葡聚糖凝胶(分子筛)可去除部分热原。

~15nm孔径的超滤膜除去部分热原。

如采用离子交换法、反渗透法等，也可通过吸附或滤过作用除去部分热原。

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四、检查热原的方法
中国药典现行版本规定热原检查采用：
（一）家兔法
（二）细菌内***检查法
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（一）家兔法
《中国药典》现行版规定热原检查法系将一定量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。
家兔法作为热原检查法，仍是目前各国药典法定的方法。因家兔对热原的反应与人基本相似，试验成本相对比较低。对供试家兔的要求、试验前的准备、检查法、结果判断药典均有具体规定。
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检查结果的准确性和一致性取决于试验动物的状况、实验室条件和操作的规范性。
供试验用家兔应按药典要求进行选择，以免影响结果。
家兔法监测内***，试验结果接近人体真实情况。
但该法操作繁琐费时，不能用于注射剂生产过程中的质量控制，且不适用于放射性药物、肿瘤抑制剂等细胞毒性药物制剂。
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（二）细菌内***检查法
细菌内***检查法系利用鲎试剂来检测或量化革兰阴性菌产生的细菌内***，以判断供试品中细菌内***的限量是否符合规定的一种方法。细菌内***的量用内***单位（EU）表示。
鲎是节肢动物门、螯肢亚门肢口纲剑尾目的一种海生动物，又称鲎珠。
鲎的血细胞溶解物与内***之间产生凝聚反应。鲎试剂即鲎的血细胞溶解物。
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细菌内***检查法包括凝胶法和光度测定法两种方法：
凝胶法系利用鲎试剂与细菌内***产生凝集反应的原理来检测或半定量内***；
光度测定法包括浊度法和显色基质法，系分别利用鲎试剂与内***反应过程中的浊度变化及产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少来测定内***。
供试品检测时可使用其中任何一种方法进行试验，当测定结果有争议时，以凝胶法结果为准。
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鲎试剂法检查内***，比家兔法灵敏10倍，操作简单易行，实验费用低，结果迅速可靠，适用于注射剂生产过程中的热原控制和家兔法不能检测的某些细胞毒性药