致病性微生物的实验诊断学基础.ppt

致病性微生物的实验
诊断学基础
浙江省医学科学院
何浙生
1
一、常见细菌性传染病的病原学及
血清学诊断基础
法定细菌性传染病种类:
甲类传染病:鼠疫、霍乱;
乙类传染病:细菌性痢疾、伤寒和副伤寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹伤寒;
丙类传染病:肺结核、麻风病、感染性腹泻。
2
采样注意事项:
时间性
针对性
防护与消毒
无菌操作
标记
昆虫、动物标本
3
临床与尸解取材参考表
病人取样解剖取样
————————————————————————————
待诊血尿便痰唾咽脑腺局肝脾肺肠淋骨脑
病种液洗脊穿部巴髓
液液液穿结
刺
——————————————————————————————————
斑疹伤寒++ +
鼠疫+ ++ ++ + ++ ++ + ++ ++
霍乱 ++ +
炭疽++ +   + + ++ ++ ++ ++ ++ +
布病++ + + ++ ++ +
伤寒、副伤寒++ + ++ ++
痢疾  ++
肉毒毒素中毒+
钩体病++ ++
———————————————————————————————————
注:++代表一定要取样,+代表亦应取样
4
样品保存:
冷藏保存
保存液保存
5
标本运送:
严格包装,外表消毒,编号,登记,贴标签,严防容器破碎、滴漏,避免活标本逃逸等;
附送检单,填明名称、数量、地点、时间等;
专人护送,不要委托携带,尽快到达目的地;
妥善保存,运送途中避免高温、日光、过度震动等。
6
非污染材料检验程序
动物
非污染样品
保存一部分(以备再查)
血清学
检查
镜检
细菌培养
查Ag
查Ab
染色及非染色
免疫荧光
镜检
鉴定
镜检
分菌
血清学检验
G染色及其他染色
免疫荧光
G染色及其他染色
免疫荧光
镜检
鉴定
查抗原
查抗体
7
被污染材料检验程序
样品处理
污染样品
保存一部分(以备再查)
上清或滤过液(病毒)
沉淀物或滤阻物
(经一定稀释)
接种
小鼠
︹
查肉毒毒素
︺
接种幼猫
︹查葡萄球菌肠毒素︺
︹病毒、立克次体等︺
细菌培养
查抗原
CFT
协同SAT
反向HAT
HAIT
等
镜检
动物
细菌培养
G染色及其它染色
IFT
查
抗
原
查抗体
分
菌
镜
检
鉴
定
8
细菌病原学诊断检样处理
一般样品处理:包括洗脱、提取、浓缩和抗杂菌等;
节肢动物标本处理
蚤类:制作标本时挤出前胃,涂片,分菌时可用单体也可用群体,研碎后接种培养。
蜱:用消毒液浸洗后研磨,分菌。
蝇:用选择性增菌液洗,培养洗液。
蚊:对细菌性传染病意义不大,主要时对病毒性传染病意义较大
9
病原鉴定
菌属的确定
细菌种型的确定
细菌染色
细菌生化反应试验
糖代谢试验
有机酸、铵盐反应
蛋白、氨基酸、含氮化合物
呼吸酶类试验
毒性酶类试验
胆汁(胆盐)溶菌试验
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