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志贺氏菌和致泻大肠埃希式菌的检验课件.ppt


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志贺氏菌及其检验
致泻大肠埃希氏菌及其检验
志贺氏菌及其检验
志贺氏菌
一、生物学特性
1、革兰氏阴性杆菌
2、无荚膜、无鞭毛、无芽孢,有菌毛
3、需氧或兼性厌氧
4、易于在普通培养基上生长
5、四个亚群
革兰氏阴性鲍氏志贺菌
志贺氏菌的菌毛
(二)临床症状
三、致病性:
A、急性细菌性痢疾:
急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢。
B、慢性细菌性痢疾:
慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型。
四、微生物学检验
(一)检验步骤
检样→样品处理→增菌培养→SS、HE平板分离培养→初步生化鉴定→最后血清学鉴定→报告
1、增菌培养
培养基:GN增菌液
培养条件:36±1℃6—8h
当培养液出现轻微混浊即中止培养。
操作:称取检样25g,加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内,固体食品用均质器以8000~10000r/min打碎1min,或用乳钵加灭菌砂磨碎,粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化,于36℃培养6~8h。培养时间视细菌生长情况而定,当培养液出现轻微混浊时即应中止培养。
2、分离培养
强选择性平板:SS或HE
弱选择性平板:麦康凯或伊红美蓝平板(EMB)
在工作中36±1℃培养18—24h,
菌落特征:无色透明,中等大小,光滑圆形菌落
HE平板原理及反应
发酵乳糖的某种肠杆菌
不发酵乳糖的某种肠道菌,而且产生硫化氢,可能是沙门氏菌
不发酵乳糖的肠道菌,可能就是志贺氏菌
麦康凯琼脂平板
3、初步生化试验:
挑取平板上的可疑菌落,接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各1管。一般应多挑几个菌落,以防遗漏,经36℃培养18~24h,分别观察结果。
原理:本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。用于观察细菌对糖的利用和硫化氢(变黑)的产生。该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1,只能利用葡萄糖的细菌,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。

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  • 上传人yzhluyin9
  • 文件大小2.76 MB
  • 时间2022-11-29