志贺氏菌和致泻大肠埃希式菌的检验.ppt

志贺氏菌及其检验志贺氏菌一、生物学特性1、革兰氏阴性杆菌2、无荚膜、无鞭毛、无芽孢,有菌毛3、需氧或兼性厌氧4、易于在普通培养基上生长5、四个亚群革兰氏阴性鲍氏志贺菌志贺氏菌的菌毛二、污染途径即可产生内***,也可产生外***,是侵入性细菌传染源:食物、病人、粪便、苍蝇等主要污染凉拌菜(二)临床症状三、致病性:A、急性细菌性痢疾:急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢。B、慢性细菌性痢疾:慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型。四、微生物学检验(一)检验步骤检样→样品处理→增菌培养→SS、HE平板分离培养→初步生化鉴定→最后血清学鉴定→报告1、增菌培养培养基:GN增菌液培养条件:36±1℃6—8h当培养液出现轻微混浊即中止培养。操作:称取检样25g,加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内,固体食品用均质器以8000~10000r/min打碎1min,或用乳钵加灭菌砂磨碎,粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化,于36℃培养6~8h。培养时间视细菌生长情况而定,当培养液出现轻微混浊时即应中止培养。2、分离培养强选择性平板:SS或HE弱选择性平板:麦康凯或伊红美蓝平板(EMB)在工作中36±1℃培养18—24h,菌落特征:无色透明,中等大小,光滑圆形菌落麦康凯琼脂和HE琼脂的区别两者都选择性生长革兰氏阴性菌。onkey含胆盐及龙胆紫。加了乳糖和中性红来辨别乳糖发酵菌,如果可发酵乳糖,菌落为粉红色,不发酵为透明。Hektoenenteric除乳糖发酵外,还可以区分硫化氢。主要用来区分两类细菌:沙门和变形杆菌不发酵乳糖,产硫化氢,黑色克隆;志贺和鼠疫杆菌不发酵乳糖,不产硫化氢,克隆透明。HE平板原理及反应发酵乳糖的某种肠杆菌不发酵乳糖的某种肠道菌,而且产生硫化氢,可能是沙门氏菌不发酵乳糖的肠道菌,可能就是志贺氏菌SS平板原理及反应SSAgar(SalmonellaShigellaAgar)大肠杆菌或者别的发酵乳糖的肠杆菌是沙门氏菌。有黑色中心。如果没有黑色中心,就很可能是志贺氏菌了