金针菇杂交育种及野生食用菌菌种驯化探究.pdf

河北师范大学
硕士学位论文
金针菇杂交育种及野生食用菌菌种驯化研究
姓名:崔鹏
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:王立安
20100410
摘要
本论文首先以 22 个金针菇菌株为材料,采用出菇试验、酯酶同工酶和 RAPD 等技
术,对 22 个金针菇菌株的农艺性状、遗传特性以及亲缘关系进行分析,选出适合做杂
交育种的亲本。随后采用孢子杂交技术进行了金针菇杂交新菌株的选育研究。最后,对
6 种野生食用菌进行了最适人工培养基的筛选研究。主要结果如下:
1. 22 个金针菇菌株的在 PDA 培养基上的生长速度测定结果表明,3 号(杂 19)、2
号(黄 1)、4 号(2102)、7 号(Bj-3)的生长速度分别为 mm/d、 mm/d、 mm/d、
mm/d,明显快于其他菌株,12 号和 13 号的生长速度最慢分别为 mm/d 和
mm/d。从菌落形态特征看,7 号(Bj-3)、16 号(三明 B)、19 号(F39)菌株菌落边缘
整齐,菌丝洁白、粗壮。出菇试验结果表明,7(Bj-3)号和 9 号(三明 C)的第一潮菇
生物学效率最高,分别为 %和 %,且差异不显著,适合做为金针菇工厂化菌
种;19 号(F39)最低,只有 %。子实体成熟时间短最短的为 1 号(2012),为 ,
其次为 4 号(2102)、18 号(1301)、2 号(黄 1),分别为 d、 d、 d,最长
的为 10 号(HE-1),需要 。
RAPD 技术对 22 个金针菇菌株亲缘关系分析发现:其中 7
号与 8(日金 1 号)、9(三明 C)、10 号(HE-1)之间的相似系数为 ,说明 7 号与 8、
9、10 号之间的亲缘关系非常远。从表中的相似系数数值可以看出,1(2012)、2(黄 1)、
7 号(Bj-3)之间的亲缘关系比较近,8、9、10 号之间的亲缘关系比较近。5 号(苏 6)
菌株与 20 号(新苏 6)菌株的相似系数为 说明这两个菌株很可能是同种异名的菌株。
1、2、7 号与 8、9、10 号菌株之间的亲缘关系较远。
综合分析菌株的生物学性状及亲缘关系特点,发现:黄金针菇 7 号(Bj-3)在菌丝
生长速度、子实体成熟时间、第一潮菇的生物学效率方面表现优良,但是柄盖比数值偏
低,且子实体形态特征不佳,而白金针菇 10 号(HE-1)的柄盖比数值高,且子实体形
态特征好;Bj-3 和 HE-1 的相似系数仅为 ,说明二者之间的亲缘关系很远。最后选择
7 号和 10 号做杂交亲本,以期选出具杂种优势的白色或黄色菌株。
3. 以 7 号(Bj-3)和 10 号(HE-1)菌株子实体孢子为材料,通过单核菌丝杂交获
得 75 个杂交后代。利用出菇试验对 75 个菌株的菌丝生长速度、菌落形态特点、成熟时
间、第一潮菇生物学效率、子实体形态研究发现,菌丝生长速度较快的菌株为:13 号、
III
24 号、57 号;菌落边缘整齐,菌丝粗壮、致密的菌株有:1、2、5、9、10、11、13、
15、16、17、20、21、22、25、29、30、33、34、37、40、41、42、45、47、48、52、
55、56、57、59、62、64、66、67、69、70、71、73 号;子实体成熟时间较短的菌株为:
12 号、28 号、44 号、57 号;第一潮菇生物学效率较高的菌株为:5 号、8 号、27 号、
57 号;子实体商品性状较好的菌株为:4、13、16、17、42、57 号。综合分析共筛选出
13、16、57、66、73 号 5 个杂交菌株为较优良的菌株。5 个杂交菌株的酯酶同工酶谱分
析表明,其和亲本存在较好的亲缘关系。
4. 对采集于河北省境内的 6 种珍稀野生食用菌的母种、原种培养基的筛选以及对培
养温度、培养基 pH 值的研究结果表明,在母种培养基筛选方面,香杏丽蘑(Calocybe
gambosa)和荷叶离褶伞(Lyophyllum decastes)的最适培养基为 PDA 加富培养基;小
白蘑菇(tulus)的最适培养基为酱油洋葱琼脂培养基;大杯伞 Clitocybe
maxima)和白桩菇(Leucopaxillus candidus)的最适培养基为麦粒煮汁培养基;斜盖
伞( Clitopilus prunulus)的最适培养基为木屑煮汁培养基。在原种培养基筛选方面,香
杏丽蘑和小白蘑菇的最适原种培养基为棉籽壳