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细菌的生化反应实验
掌握细菌鉴定中常用生化实验的原理和方法
了解细菌生化试验在细菌鉴定及诊断中的重要意义
一、实验目的
二、实验原理
不同的细菌具有不同的酶系统,对糖类和蛋白质的分解能力不同,最终形成的分解代谢产物不同。
通过对代谢产物的检测,可鉴定细菌。
吲哚试验Indol
细菌分解培养基中的色氨酸,生成吲哚,吲哚可与试剂中的对二甲氨基苯甲醛作用,生成玫瑰吲哚而呈红色
两液面接触处出现红色为阳性,无色为阴性
***红实验()
微生物进行混合酸发酵,产生各种有机酸——pH下降——加入指示剂***红——红色
结果:
将结果填入下表,“”表示产酸或产气;“+”表示产酸不产气,“-”表示不产酸不产气。
糖类发酵
大肠杆菌
未知菌
对照
葡萄糖发酵
乳糖发酵
OF:Oxidizeandferment
氧化发酵实验
(二)IMViC试验(吲哚、***红、伏-普、柠檬酸盐)
用接种针将大肠杆菌与未知菌分别接种于2支蛋白胨水培养基(吲哚试验),2支葡萄糖蛋白胨水培养基(***红试验和伏-普试验),2支柠檬酸盐斜面培养基,置37℃培养2d。
(1)吲哚试验:于培养24h后的蛋白胨水培养基内加3-4滴***,摇动数次,静置1-3分,待***上升后沿试管壁徐徐加入2滴吲哚试剂,在***和培养物之间产生红色环状物为阳性反应。
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