猪瘟ELISA抗体检测试剂盒说明书.doc

猪瘟ELISA抗体检测试剂盒说明书
猪瘟ELISA抗体检测试剂盒
猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒
使用说明书
【简介】
试剂盒由抗原包被的微孔板,酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成,应用间接ELISA原理检测猪血清中抗猪瘟病毒抗体。
【用途】
猪瘟ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中猪瘟病毒抗体。评估猪场猪瘟疫苗免疫状况,感染猪的血清学诊断。
【原理】
本试剂盒是采用猪瘟抗原包被微孔板,在试验中,加入稀释的对照血清和待检血清,经温育后,若样品中含有抗猪瘟病毒的特异性抗体,则将与检测板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入HF溶液终止反应后,用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。
【试剂盒主要成分】
1 包被抗原的微孔板 2块(96孔/块)
2 阴、阳性对照血清各1管()
3 羊抗猪酶标二抗 1瓶(20ml/瓶)
4 20倍浓缩洗涤液 1瓶(30ml/瓶)
5 底物A液、B液各1瓶(10ml/瓶)
6 终止液 1瓶(10ml/瓶)
7 样品稀释液 1瓶(50ml/瓶)
8 血清稀释板 2块(96孔/块)
9 说明书 1张
【样品制备】
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。
【洗涤液配制】
使用前,浓缩的洗涤液应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解(最好在37℃水中加热5-10min),然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释(例如:每板用20 ml浓缩液加上380ml水),稀释好的洗涤液在4℃可以存放7天。
【样品稀释】
在血清稀释板中按1:40的体积稀释待检血清(195μl样品稀释液中加5μl待检血清)。
注意:阳性对照和阴性对照1:40稀释,(234μl样品稀释液中加6μl对照血清)。
【注意事项】
1 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,使用后放回2-8℃。
2 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
3 不要用口移液。
4 TMB(底物液B)不要暴露于强光,避免接触氧化剂。
5 检测板拆封后避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,应尽快置于4℃)。
6 待检血清样品数量较多时,应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清,再将稀释好的血清转移到检测板,使反应时间一致。
7 浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释,如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。
8 严格按照操作说明书可以获得最好的结果,操作过程中移液,定时和洗涤等的全过程必须精确。