级硕士生高效液相色谱培训司兴奎演示文稿.ppt

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(优选)级硕士生高效液相色谱培训司兴奎
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一、概述二、高效液相色谱仪三、HPLC分离类型四、HPLC固定相和流动相五、影响HPLC分离因素与条件选择
主要授课内容
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石油醚
碳酸钙颗粒
色素混合物
分离组分
1903年由俄国植物学家茨维特分离植物色素时,将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后加入石油醚使其自由流下,结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。这种方法因此得名为色谱法(chromatography)。
1概述
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流动相:携带样品流过整个系统的流体,可以是液体,也可以是气体。
固定相:填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相,可以是固体,也可以是液体。
色谱柱:装有固定相的玻璃管或不锈钢管。
色谱法:又称层析法,是根据利用样品中不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的样品混合物进行洗脱,不同物质以不同速度沿固定相移动,最终达到分离的效果的一种分离和分析方法。

不同相态包括:气-固,GS;气-液,GL;
液-固,LS;液-液,LL。
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液相色谱(以流动相)
LiquidChromatography(LC)-LSC/LLC
高效液相色谱(以流动相)
HighPerformanceLiquidChromatography(HPLC)
气相色谱(以流动相)
GasChromatography(GC)-GSC/GLC
薄层色谱(以固定相)
Thin-LayerChromatography(TLC)
毛细管电泳
CapillaryElectrophoresis(CE)
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液相色谱分离系统由固定相和流动相组成;
固定相可以是吸附剂、化学键合固定相(或在惰性载体表面涂上一层液膜)、离子交换树脂或多孔性凝胶;
流动相是各种溶剂(或洗脱液);
被分离混合物(溶质)由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。

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柱层析分离法的有关装置
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实验室柱层析装置
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