白胡椒蛋白的提取.doc

白胡椒蛋白的提取
第一部分文献综述
蛋白质提取的研究进展
引言蛋白质是生命的构成物质,胡椒既是一种常用的调味品,也具有一定药性,可以起到食疗的作用。胡椒大部分都生长于高温和长期湿润地区,性味辛热,因此温中散寒止痛的作用比较强。白胡椒的药用价值稍高一些,调味作用稍次。它的味道相对黑胡椒来说更为辛辣,因此散寒、健胃功能更强。
。蛋白质抽提前先将细胞组织破碎,使蛋白质所含基团暴露在外,然后加用适当的提取液,使细胞中的蛋白质溶解出来。蛋白质抽提液经离心或过滤去掉不溶物。再根据蛋白质的特性将蛋白质从蛋白质粗溶液中分离出来。植物蛋白质的提取方法主要有以下几种:

通过改变蛋白质溶液条件,破坏维持溶液体系稳定的因素,蛋白质就会从溶液中沉淀出来。因而,常用于沉淀蛋白质的方法,也就是从破坏溶剂水化层和双电层结构入手,在蛋白质溶液中加入脱水剂等。
a盐析法:通过在蛋白质溶液中加入中性盐(硫酸盐、碳酸盐或***化钠等),在低盐浓度下,蛋白质的溶解度随盐的浓度提高而增大,这个过程称为盐溶。但当盐浓度增加到一定程度时,在盐离子的作用下水分活度大大降低,同时蛋白质表面电荷被中和,蛋白质分子外表的水膜被破坏,蛋白
质分子相互聚集而沉淀析出,这就是盐析。
盐析法成本低,不需要特别的设备,操作简单,安全,对蛋白质的破坏作用较小。但是蛋白质经盐析沉淀分离后,产品中夹带不少盐分,还需进行脱盐处理。 b等电点沉淀分离法:蛋白质等电点沉淀分离法主要是利用***电解质分子(蛋白质)在电中性是溶解度最低,不同的***电解物质具有不同的等电点而进行分离的一种方法。对于蛋白质***电解质,在其等电点的净电荷为零,蛋白质溶解度最小,容易相互聚集成为较大的颗粒而发生沉淀。

超滤是以压差为驱动力的膜分离技术。比膜孔小的物质和溶剂一起透过膜,而较大的物质则被截留。分离过程中无相变化,能保持天然蛋白质物理化学特性; 1
分离过程不用添加任何化学试剂,无需热处理,特别适用于热敏性物质;超滤设备和工艺较其它分离方法简单,耗能低,滤膜可以反复多次使用;超滤处理量大,处理时间短,样品残留小,产品收率高。
与碱溶酸沉淀法提取蛋白质工艺相比,超滤膜法所得大豆分离蛋白质灰分较少,蛋白质含量较高,氮溶解指数高。适用于添加在饮料和婴儿食品中。
但是超滤在提取蛋白质过程中也存在着一定的问题:1膜污染,膜污染通常分为表面污染和内部污染,表面污染是由于蛋白质与膜相互作用而在膜表面吸附;内部污染是由于蛋白质沉淀而堵塞膜孔径。蛋白质吸附在膜表面上常是形成污染的主要原因,调节料液的pH远离等电点可使吸附
作用减弱。但如吸附是由于静电引力,则应调至等电点。盐类对膜污染也有很大影响,pH高,盐类易沉淀;pH低,盐类沉积较少。加入络合剂如EDTA等可防止钙离子等沉淀。2浓差极化与切向流过滤,浓差极化是被处理液在过滤过程由于溶质微粒形成的次生凝胶层,是阻碍膜过滤的最大障碍。切向流过滤(TFF)是防止浓差极化造成速度下降的最有效方法。TFF是指液体在泵的驱动下沿着与膜表面相切的方向流动,在膜上形成压力,使部分液体透过膜,另一部分液体切向地流过膜表面,将被膜截留的粒子和大分子冲走,避免它们在膜表面上堆积造成膜堵塞和流速下降。所以TFF是一种理想的膜分离方法。

蛋白质的泡沫分离是利用蛋白质与气体形成大量气泡,使具有表面活性的蛋白质在气液界面发生吸附,形成稳定的、富集蛋白质的泡沫层,再经过消泡,就得到了浓度较高的蛋白质溶液。
泡沫分离在蛋白质分离方面有着其他分离方法无法比拟的优势。一是设备简单,能耗低;二是分离过程中不使用其他化学试剂,分离组分纯净,同时也降低了分离的成本;三是泡沫分离过程的操作条件温和,在室温下即可进行,适用于蛋白质等热敏性和化学不稳定性成分的分离;特别适用于低浓度组分的浓缩和回收。

表面活性剂是由亲水的极性头和疏水的非极性尾两部分组成的,在非极性的有机溶剂中,当表面活性剂超过一定浓度时,表面活性剂的极性基团和非极性基 2
团定向排列,形成一种与水相微胶团结构相反向的聚集体,这种聚集体被称为反相微胶团。反相微胶团分离蛋白质主要分成两大步,第一步使蛋白质或酶等生物大分子以水壳的形式存在于反相微胶团中的极性核心部分,即形成反向微胶团;第二步是将胶团送入到澄清器中,使反相微胶团和有机溶剂分离,然后将反相微胶团进行破乳从而使蛋白质得以释放分离。水相pH、盐浓度、蛋白质相对分子质量及阳离子种类对反相微胶团分离提取蛋白质有一定的影响。
此外,树脂法、壳聚糖吸附法、色谱法、双水相萃取技术都在蛋白质分离提