实训四阿司匹林肠溶片的含量测定
高效液相色谱法基本理论知识
高效液相色谱仪的组成
高效液相色谱仪的操作
实训操作:高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片的含量
液相色谱:经典液相色谱法
高效液相色谱法
高效液相色谱法
经典柱色谱法
高压输送流动相
无外加压力
固定相粒度小、分布均匀
固定相粒度大、分布不均
色谱柱长度固定,内径小
色谱柱长度差别大,内径大
安装了在线检测器
未安装在线检测器
分离效能高,分析速度快
分离效能低,分析速度慢
高效液相色谱法的特点
一、固定相:填充剂
:
颗粒细且均匀
传质快
机械强度高,能耐高压
化学稳定性好,不与流动相发生化学反应
高效液相色谱的基本原理
:用化学反应的方法将固定液的官能团键合在载体表面,多用硅胶作为载体。
(1)非极性键合相
非极性烃基,如C18﹑C8﹑C1与苯基等键合在硅胶表面。
用于反相色谱。
ODS键合相
(2)弱极性键合相
醚基和二羟基等键合相
用于反相或正相色谱
(3)极性键合相:
常用氨基﹑***基键合相(***乙硅烷基≡Si(CH2)2CN)键合硅胶
一般用于正相色谱
使用过程中不流失
化学稳定性好
适于梯度洗脱
载样量大
注意:
流动相的pH一般应在2-8,否则会引起硅胶溶解。
二、流动相:洗脱剂
与固定相不发生化学反应
对试样有适宜的溶解度
纯度高,粘度小。
与检测器相适应。
n由色谱柱(固定相)性能决定
α主要受溶剂种类的影响,α=K2/K1=k2/k1
k受溶剂配比的影响。
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