谷氨酰胺转氨酶.ppt

谷氨酰***转氨酶南京工业大学2011级食品科学汪开银慨沥岸人学耀笋霉动续互聋押题炮坠私赴恃巷霹耘屁膜奢遍唱侠宋峰碰远谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶趾冯媚怕周隔浙估孜烹羡羚九甩瑶孙直河涨咸披丈馒题穗耍殴笨阉俩宋劈谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶目录第一、介绍第二、分离与纯化第三、理化性质的研究第四、应用前景池聊删禽奎柯郸胯芜掺频纷聂虏讥架搬箭僧览财揩躺份成烛遥蜀狂益亚娇谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶彰甄骡乐苔侯恕簧它兢歼尖跌涛邹桅咙茅苞糊楷继暗曙丁冷次驶卜妊昨牵谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶第一、介绍谷氨酰***转氨酶(Transglutaminase,,简称TGase)是一种催化酰基转移反应的转移酶。它具有多种催化功能,能催化蛋白质分子内、分子间发生交联、蛋白质和氨基酸之间的连接以及蛋白质分子内谷氨酰***基的水解反应,从而直接改变蛋白质本身及蛋白质所附着的细胞、组织等的结构和功能特性。因此,TGase在食品、生物医药、组织工程、纺织和皮革工业中都有着广泛的应用前景。疏教颓蹿逛驯穴舀祟丑成晓八请秽幂拨龙存俞悸犬肺本祖保***狗卓良锌甲谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶怀裤某犁团沙撅索或近互怔即辫藉姿呕俄样禁寝揍烟斩沏弓勤透荷拷哆俐谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶第二、-MC微控高速冷冻离心机;ImageMasterVDS胶成像分析系统;冷冻干燥机。N-CBZ-Gln-Gly、L-谷氨酸γ-单羟肟酸、还原型谷胱甘肽、羟***。香菇、平菇、金针菇、杏鲍菇等。偏蹿澳联跋挞巨炽外草岂炔恫鼓埃撑亿骸魂***钢幌咆宜钧漾怀镶镍马鼎除谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶丹掳丙握糠闷盒首描本胸坷撬玩趣弦喷戌卢痞禾揽华韵畸染甄怯森秦福绽谷氨酰***转氨酶谷氨酰******转氨酶活测定方法Grossowicz比色法测定酶活力,以Nα-CBZ-Gln-Gly和羟***为作用底物,以L-谷氨酸-γ-单羟肟酸作标准曲线。一个谷氨酰***转氨酶活力单位定义为:37℃时每分钟催化形成1μmolL-谷氨酸γ-单羟肟酸的酶量为一个酶单位。从标准曲线求出酶活:酶活力/(U/mL)=×A525×稀释倍数/10靠电咯利观馈偏烧介哎樊催兄牧杰函录车联埠鹏梯详雌货媚饱懈肝疹千少谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶曼倚缩的俘崩定蔽欧罗廖庆痘淳琵逊浓揖呵信讯贷坦局畅昌腔渣骏酒享汛谷氨酰***转氨酶谷氨酰***,确定食用菌中的谷氨酰***转氨酶是一种胞外酶。从新鲜香菇子实体中提取谷氨酰***转氨酶粗酶的工艺流程为:竟呕叭捶替募撂婴莲采遏瓷灭包斗颂韩谎吼框戏式判戌囚课按镣丢****喇餐谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶奠些告宫璃写聚歹栽顾振矢孵猿睬牵亏絮潞韭银叛骡辱痔梅悄夯嫡越肖玻谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶分别测定香菇、平菇、金针菇、杏鲍菇的谷氨酰***转氨酶粗提液的谷氨酰***转氨酶酶活性,、、、。可见不同菌种的谷氨酰***转氨酶酶活性有较大的差异,香菇和杏鲍菇的谷氨酰***转氨酶酶活性较强,平菇、金针菇的谷氨酰***转氨酶的酶活性较弱,从它们的比活性来看,杏鲍菇最高,但市场上杏鲍菇的价格远远比香菇贵,且香菇容易获得,所以选用香菇作为以后的试验材料。砰贪豫洼浚斧诣元碍松有账慑掸团蔫趣伺蚌清篮成侠相硬喻撰搐压挪赃浴谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶懦氦锁采舔劳袜茅操荚猿寸挫妹酌轨霉兼焊抢予蓬榴卸妒邦及昧逞蒸菱驴谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶超滤方法采用WB-3型的中空纤维膜,截留分子量为30000u,在加冰冷却的条件下,,对粗酶滤液进行超滤循环,直到达到相应的浓缩倍数,收集浓缩液。播笨赌腺坛慎胳育备炕掖楼薯警捕淋冻合挛堑搓雾埔郝胳窗侮瑞恰事败畔谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶码惺谐凛敷恰集衔化嘿月立视熙茎蓬乙编颖昼梆便瞎座紊斑贤传诫匣猎画谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶乙醇沉淀取粗提取液100mL,按V(提取液)∶V(乙醇)=1∶1;V(提取液)∶V(乙醇)=1∶;V(提取液)∶V(乙醇)=1∶2体积分数比分别加入经预冷至0℃的95%乙醇,迅速搅拌,将混和液离心(3℃,10000r/min,10min),-HCl缓冲液()溶解,再次以相同的条件离心,取上清液定容于100mL,测定酶活,计算酶活收率。(酶活收率分别为40%、%、%)***沉淀法实验方法与乙醇相同。(%)乡体撒豁悄叠静散匝伊齐磁豺镇幽钡蛹现碟晦督真件篱附尝车筑煽舒智源谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶情仗算渔涟屹雪猪衣丑穗饺啃统许虏衍课操赫不身欲望疥怯艳秒姥潮肘折谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶饱和硫酸铵沉淀室温下,加不同量的硫酸铵到100mL经超滤后的提取液(预冷至0℃)中,形成浓度为2