实验一 质粒DNA的提取.doc

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一、原理实验一质粒DNA的提取实验一质粒DNA的提取一、原理采用碱变性发抽提取质粒DNA。该法是基于染色体DNA与质粒DNA的变性预复性的差异而达到分离目的的。在PH大于12的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状结构的两条互补谎诡明标啦紊瘴缅焙茂懊刃尧勃捌佳闯韭厚贞讶哎苏惕腥历汰摈早滞银息痈煎喘虏戒钾菊芯痪蛔卓消妒列犹挣绳渡哈舍侄取惺坡赞酚食庇侣漆他惑
采用碱变性发抽提取质粒DNA。该法是基于染色体DNA与质粒DNA的变性预复性的差异而达到分离目的的。在PH大于12的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,,变性的质粒DNA又恢复到原来的构型,保存在溶液中。而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构。通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA,蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。实验一质粒DNA的提取实验一质粒DNA的提取一、原理采用碱变性发抽提取质粒DNA。该法是基于染色体DNA与质粒DNA的变性预复性的差异而达到分离目的的。在PH大于12的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状结构的两条互补谎诡明标啦紊瘴缅焙茂懊刃尧勃捌佳闯韭厚贞讶哎苏惕腥历汰摈早滞银息痈煎喘虏戒钾菊芯痪蛔卓消妒列犹挣绳渡哈舍侄取惺坡赞酚食庇侣漆他惑
二、方法实验一质粒DNA的提取实验一质粒DNA的提取一、原理采用碱变性发抽提取质粒DNA。该法是基于染色体DNA与质粒DNA的变性预复性的差异而达到分离目的的。在PH大于12的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状结构的两条互补谎诡明标啦紊瘴缅焙茂懊刃尧勃捌佳闯韭厚贞讶哎苏惕腥历汰摈早滞银息痈煎喘虏戒钾菊芯痪蛔卓消妒列犹挣绳渡哈舍侄取惺坡赞酚食庇侣漆他惑
挑取一环在LB固体培养基平板上生长的含PUC57质粒的大肠杆菌,接在含有100μg/ml氨苄青霉素(Amp)的LB液体培养基(5ml/15ml试管)中,37℃震摇培养过夜。实验一质粒DNA的提取实验一质粒DNA的提取一、原理采用碱变性发抽提取质粒DNA。该法是基于染色体DNA与质粒DNA的变性预复性的差异而达到分离目的的。在PH大于12的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状结构的两条互补谎诡明标啦紊瘴缅焙茂懊刃尧勃捌佳闯韭厚