酶的专一性实验报告.doc

酶的专一性实验报告实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称:生物化学实验(甲)指导老师:成绩:实验名称:酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型:分离鉴定实验同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填)三、主要仪器设备(必填)五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理(必填)四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析(必填)?.酶的基本性质——底物专一性一、。。,设计酶学实验。二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017倍。酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种:。:有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。,而对另一种则全无作用。如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。采用Benedict试剂检测反应产物。Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。Na2CO3+2H2O2NaOH+H2CO3CuSO4+2+Na2SO4还原糖(—CHOor—C=O)+2Cu(OH)2Cu2O(砖红色或黄色)+2H2与Benedict试剂无呈色反应。淀粉被淀粉酶水解,产物为葡萄糖;蔗糖和棉子糖被蔗糖酶水解,其产物为果糖和葡萄糖,它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖,与Benedict试剂共热,即产生红棕色Cu2O沉淀。本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用。三、实验材料与试剂1、实验材料?蔗糖酶(样品?);?新鲜唾液(含唾液淀粉酶);2、实验试剂?蔗糖酶液蔗糖酶液(样品?)加蒸馏水适当稀释,备用;?唾液淀粉酶液(学生自制),用蒸馏水(稀释)到25ml,用棉花过滤备用。唾液稀倍数因人而异,可稀释50,400倍,甚至更高;?5%蔗糖(.)溶液;?%淀粉溶液(%NaCl);?Benedict试剂;四、,;(37?,100?);;;;。五、实验操作方法和步骤?检查试剂取3支试管,按下表操作:注:1、检查目的:试剂是否有干扰因素存在。2、也可对蔗糖酶液、唾液淀粉酶液进行检查是否也有干扰因素存在,请自己设计。?淀粉酶的专一性取三支试管,按下表操作:注:可增加一组唾液淀粉酶液经100?加热3min处理后的样品对照组。?蔗糖酶的专一性取三支试管,按下表操作:注:可增加一组蔗糖酶液经100?加热3min处理后的样品对照组。六、结果分析讨论各试管观察结果依次是:(一):1号蓝绿色,2号蓝色,3号蓝色Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。3只试管都为蓝色说明几只试管中都没有果糖和葡萄糖,说明在不加酶时,淀粉和蔗糖不易水解。试剂无干扰因素的存在。(1号试管是蓝绿色可能是因为有少部分的淀粉水解)(二):1号土黄色,2号黄绿色,3号蓝色加入唾液淀粉酶,1号试管底物是淀粉,所以很容易水解成葡萄糖,与Benedict试剂共热,即产生红棕色Cu2O沉淀。所以1号颜色变化比较大。(2号可能是因为蔗糖在37?恒温水浴中也有少部分水解,所以颜色变化,但变化不明显。)总的来看可以看出唾液淀粉酶只对淀粉有催化活性,不能催化蔗糖水解,具有对淀粉的底物专一性。3号是对照。(三):1号蓝色,2号红棕色,3号蓝色加入蔗糖酶,2号试管底物是蔗糖,所以很容易水解成果糖和葡萄糖,与Benedict试剂共热,即产生红棕色Cu2O沉淀。所以2号颜色变化比较大。(1号可能是因为淀粉在37?恒温水浴中也有部分水解,所以有颜色变化,但变化不明显。)从这三支试管看出蔗糖酶只对蔗糖的水解有催化作用,对淀粉无催化作用,具有对蔗糖的底物专一性。3号是对照。七、思考题1(观察酶专一性实验为什么要设计这3组实验,每组各有何意义,蒸馏水有何用,第一组作为整个实验的空