冠心病患者外周血中erα基因启动子区异常甲基化及其mrna表达研究.pdf

目录

英文缩略词表…………………………………………………………1
中文摘要………………………………………………………………2
英文摘要………………………………………………………………4
正文……………………………………………………………………6
………………………………………………………………6
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………………………………………………………………27
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附录………………………………………………………………………39
致谢………………………………………………………………………40
综述及参考文献………………………………………………………41
英文缩略词表


英文缩写英文全称中文全称
AS atherosclerosis 动脉粥样硬化
Bp Base pair 碱基对
CIMT Carotid intima-media thickness 颈动脉内膜中层厚度
DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸
DNMT DNA methyltransferase DNA 甲基化转移酶
dNTP Deoxyribonucleotide triphosphate 脱氧核苷三磷酸
EB Ethedium Bromide 溴化乙锭
EC-SOD Extracelluar superoxide dismutase 细胞外超氧化物岐化酶
ER-α Estrogen receptor-α雌激素受体α
MSP Methylation Specific-PCR 甲基化特异性 PCR
PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链式反应
SAM S-adenosylmethionine S-腺苷甲硫氨酸
Taq Taq DNA polymerse 耐热 DNA 聚合酶
VSMCs Vascular smooth muscle cells 血管平滑肌细胞
5mCpG 5'methylated cytosine phosphate guanlsine 5'CpG 岛甲基化
5mC 5methylated cytosine 5 甲基胞嘧啶



1
冠心病患者外周血中 ER-α基因启动子区异常甲基化及
其 mRNA 表达的研究

摘要

目的:心血管疾病是现代社会严重威胁人类健康的主要疾病,冠状动脉粥样硬化
及其并发症在心血管疾病中占了相当大一部分比例。有关动脉粥样硬化发病机制
的学说很多,但至今仍有许多细节机制有待阐明。近年来研究认为表观遗传学机
制特别是特异基因的异常甲基化在冠状动脉粥样硬化的发生和发展中亦起着重要
的作用,成为研究的热点。本研究分别采用甲基化特异性 PCR(MSP)方法和实时荧
光定量 RT-PCR 方法检测冠状动脉粥样硬化患者和没有发现动脉粥样硬化的健康
人的外周血中雌激素受体-α(ER-α)基因的甲基化状态和 mRNA 的表达水平,通过
结合相关临床资料探讨 ER-α基因启动子异常甲基化与冠状动脉粥样硬化发生发展
的关系。
方法:纳入 2009 年 11 月至 2010 年 3 月在安徽省立医院心内科就诊的经冠脉造影
确诊为冠心病患者共 40 例作为试验组,同时纳入 20 例年龄相当的经冠脉造影和
颈动脉超声检查均未发现动脉粥样硬化的健康人作为对照组,试剂盒提取基因组
DNA,经过亚硫酸氢盐处理后,应用甲基化特异性 PCR(MSP)方法和实时荧光定
量 RT-PCR 了解 ER-α基因启动子 CpG 岛甲基化的状况及其基因 mRNA 表达的
关系,并结合相关临床资料分析该基因甲基化程度与临床参数之间的关系。
结果:(1) 40 例冠心病组患者和 20 例对照组成员的外周血液标本中 ER-α基因甲基
化阳性的共有 42 例,占总人数的 70%;其中冠心病组患者血液标本的甲基化阳性
人数为 31 人,其甲基化阳性率为 %;对照组成员血液标本的甲基化阳性人数
为 11 人,其甲基化阳性率为 55%,两组甲基化阳性率比较有统计学意义(P<)。
(2) 对于 ER-α基因的 mRNA 表达水平来说,所有甲基化阴性的标本中 mRNA 表
2
达水平是甲基化阳性标本的 倍,而冠心病组和对照组间 mRNA 表