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细菌总 RNA 快速抽提试剂盒
试剂盒组成
组分 SK8625,50 次 SK8626,100 次
Buffer Rlysis-B 50 ml 100 ml
DEPC-treated ddH2O 30 ml 60 ml
操作手册 1 份 1 份
保存方法及注意事项
试剂盒于常温运输,4°C 保存。有效期见包装。
产品介绍
本试剂盒是生工生物工程(上海)股份有限公司最新研制成功的一
种细菌总 RNA 快速抽提试剂盒。因为细菌 RNA 半衰期很短,RNA 很容
易发生降解。针对这一难题,本试剂盒采用溶菌酶与裂解液 Buffer
Rlysis-B 共同作用,快速裂解样品,再通过氯仿抽提、无水乙醇沉淀等步
骤,可获得浓度高、完整性好的 RNA。适合于从各种来源的细菌(革兰氏
阳性或阴性菌等)培养液中快速提取 RNA。
使用本试剂盒,从 1 ml 对数生长期的细菌菌液中提取 5~15 µg 总
RNA,可直接用于 RT-PCR、Northern Blot、斑点杂交等实验。
本产品具有以下特点:
1. 操作简单,全过程可在 40 min 内完成。
2. 完整性好,纯化的 RNA 几乎不会发生降解。
3. 纯度高,OD260/280 一般为 。
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试剂准备
☑自备试剂:无水乙醇、75%乙醇、溶菌酶、氯仿等。
标准抽提步骤
1. 取 1 ml 对数生长期的细菌,8,000 rpm 4°C 离心 1 min,彻底弃掉培养基,加
100 µl 溶菌酶,振荡混匀。(G-菌使用的溶菌酶浓度为 400 µg/ml,室温酶解 3-5
min;G+菌使用的溶菌酶浓度为 3 mg/ml,室温酶解 5-10 min。)
收集菌体后可用 500 µl DEPC-treated ddH2O 漂洗一次,10,000 rpm 离心 1 min,
弃上清,进一步去除残留的培养基。
2. 立即加入 900 µl Buffer Rlysis-B 震荡混匀,室温放置 3 min。
3. 向裂解样品中加入 200 µl 氯仿,充分混匀。12,000 rpm 4°C 离心 5 min,取上清。
4. 向上清液中加入 1/3 体积无水乙醇,混匀,室温放置 3 min,12,000 rpm 4°C 离
心 5 min,小心倒掉上清。
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