还原糖和总糖的测定.doc

生物化学综合实验报告

题 目：3，5—二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖
姓 名 ：
学 号：
同组成员：
分院(系）：
专业班级：
指导教师:
完成日期 ： 年 月 日
1。实验目的
用比色法测定山芋中还原糖和总糖含量
2。实验原理
先用已知浓度的葡萄糖标准溶液与DNS反应测其分光度，制得标准曲线，在测山芋中糖与DNS反应后的分光度A从而得其总糖和还原糖含量。
3。实验仪器和试剂
试剂：1g/L葡萄糖标准液、3,5-二硝基水杨酸、6mol/L HCl，
6mol/L NaOH
仪器:25，100ml容量瓶、1，5ml吸量管、50ml移液管、100ml量筒、试管、滴管、离心管、玻璃棒、洗耳球、100ml容量瓶、比色皿 离心机、分光光度计、恒温水箱
4。实验步骤
一、取六只比色管向其中加入葡萄糖标液0、0。2、0。4、、0。8、。0、、1。6、1。4、、，最后向其中各加入DNS试剂1。5毫升混合均匀后100摄恒温水浴5min，冷却后加入蒸馏水至25ml刻度线，用1号样调零，测其分光度，制得标准曲线。
二、还原糖提取：取3g山芋粉，加入30ml水，搅匀后在50摄水中保温20min，离心，取滤液,用100ml容量瓶定容得还原糖待测液.
总糖提取：，加入试管中吸取5ml HCL溶液，8ml蒸馏水搅匀,100摄下恒温水浴30min，冷却,NaOH调节PH至中性,离心,滤液用100ml容量瓶定容，得总糖待测液.
测定时取5支比色管分别加入还原糖0、1。0、1。0、0、0毫升，总糖0、0、0、、0。5毫升,蒸馏水2。0、1。0、1。0、1。5、1。5毫升,，稀释至25毫升用一号管调节分光度为0，测总糖和还原糖的分光度.
5数据处理
葡萄糖标准曲线表
管号
0
1
2
3
4
5
含糖总量（mg）
0

0。4
0。6
0。8
1
葡萄糖标液(ml）
0


0。6
0。8
1
蒸馏水(ml)
2

1。6

1。2
1
DNS试剂（ml）

1。5

1。5


吸光度A
0

0。117
0。192

0。46