左旋组氨酸对匹罗卡品致痫大鼠的抗痫作用及机制研究.pdf

天津医科大学硕士学位论文左旋组氨酸对匹罗卡品致痫大鼠的抗痫作用及机制研究姓名:翟煜申请学位级别:硕士专业:生理学指导教师:孙兵 20060501 学位论文原创性声明本人郑重声明:所曼交的论文是我个人在导师指导下独立进行磺究工作取褥戆研究成集。除了文中特剐加以标注弓|用的内容和致谢的地方外,论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中俸了嗳确酶说鹾并表示了谢意。学位论文作者签名:翌煜日触箩月f2日学位论文版权使用授权书本人完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定, 即:学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印绒扫描等复制手段保存、汇编以供态阕和借阕。慝意学校蠢国家有关部fj或祝穆送交论文,并编入寿关数据疼。作者签名:翟煜导师签名:二必墨麓:友∞占年岁月jz曩硕士研究生学位论文摘要左旋组氨酸对匿罗卡品致病大鼠的抗痫作用及机制研究目的:癫痫是一种慢性、反复性、突然发作性的大脑机能失调疾病。其特征为中枢享孛经系统反复敬、进度同步纯款、劈鬻瓣逛诧学活动,其产生静辊铡滏采究众清楚。左获缝氨黢(L-histidi辩,)为一杂环氨基酸,,它是组骏静前体物质,组***作为一种神经调质或神经递质猩许多中枢活动中怒着重要的调节作用,近年的研究发现脑内组***与癫痫密切相关。(Pilocarpine,PLO)致癜大鼠模型脑魄和行为改变的影响,并进一步凌态溪察箕对中抠弹经系绫中耱经获Y<羲e戳。辫辨韬e-Y,弹pY)熬袭迭黻及对神经鞠臌凋芒的干预作用,为深入研究癫痫的发瘸机制和寻找有效豹治疗途径提供靶点。方法:l、实验动物:本燕验选用体重为240~26魄的健康成年雄性SD大鼠。 2、动携手术:将大鬣头邦潮定予脑立体定位铰士,按照大藏立钵定佼霾谱,分翳在双测额时和矮时安装麓电记录毫掇,记蒙发屡的脑电匿(E嚣G),参考电极设在枕骨中央部,术后休息5天,然后进行记录。 3、脑电记录:采用日本光电机对给药后动物连续描记2h,脑电观察指标为发作潜伏期、大发f乍潜伏期、大发作次数、瘸波频率及发作各除段的潜伏期。 4、爨壤甥冀:记录宠华,凌貔采翔·玉薤灌注凝麓,徽石精溺冀遴籍疆E染色, 进行兔疫组化染色,观察NpY动态表达情况,用原位细胞凋亡检测法(TUNEL) 观察干预前后神经元细胞凋亡的动态变化。 5、统计方法:,按单因素方差分柝( 硬士磺究生学证论文 ANOVA)进行统计学处理,同一区域不同组均数间行q检验。缩集:l、药物予颈组各磺脑毫指标与干颡对照缝榴眈,蓑鄹有统计学意义, 药物干预后的各阶段潜伏期、痫波频率及大发作次数均有显蒜降低。 2、麟染色显示:PLO组海马各区神经元显著变性、死亡,细胞结构瓦解。海岛 cA3鼷最早最明显,CA2和CA4瘸变轻,齿状嘲圆G)无鼹著享枣经元缺失。胶度缨胞增嫩。DO的浅颗粒层和内分子层开始出现MF发芽,并逐渐增加。,差鬟套统诗学意义。 3、免疫组化染色显示:PL0缎各时间点海马器区NPY阳性细胞数表达增多,明显意予L一壬{is予颈组,存活3天螽NPY粥***缨稳数在门医及齿蔽瑟表这逐渐下降, 但仍离于对照组。 4、海马凋亡鞭l经元编施计数:PLo致瘸后1d弼亡细胞数达到离峰、之后逐渐下降,。结论:1、在PL0点燃癫痫模型中,L-H{s不仅可以延迟PLO点燃的形成,遥可以搀镑4点燃压的癫瘸发终过程,鼓藤提示L。薹垂is在对撬跨挛搜癫瘸全赛性发传中起到了较重要的作用。 2、癫癍发终爨海马各嚣NPY表达增多,提示凇Y与癜瘸之霜露薏密不可分筑美系。 3、遂遗免疫缀纯研究与神经细脆麓亡研究显示,缝氨酸其有箍著韵抗瘸律羯。 4、组氨酸减缓大鼠PLO诱发癫痫的形成是由于组氨酸增加了脓内组***水平或使脑内缀***盼合成增加之敌。其作用主要与突触前膜Hl受体和H3自身受体相关。关键词:左旋组氨酸, 癫痫,海马,神经肽Y, 凋亡 2 硕士研究生学位论文 Study onresistedef怒cts andmechanics ofL一越stidine on piloca叩in0 evoked epilepsic model of rat o毯姆耄i冁:E疹诤sy is a diseaS。凌a圭is s蘸z挂聪sl。wly鞘d f谨e采ly。确e cha稼ct酾stics of矗is也e duely alldfepeat王yeiec嫡c—chemica王feac糕on ofcen枉ai nerVe gene豫ted mechanism ofttledi8ease isstill not cl