培养基模拟灌装试验.pptx

培养基模拟 灌装试验
培养基模拟灌装试验
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无菌概念
什么是无菌?
理论上：无菌＝没有任何活微生物
实际上：我们无法证实产品中没有活微生物存在
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无菌概念
“无菌”实际定
培养基灌装方案
灌装过程连续时间
人员和工作班次
环境监测办法
干预办法
容器检验
培养方法
可接收标准
污染调查
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关键原因一:起始步骤
新版GMP第四十八条：。。。应尽可能模拟常规无菌生产工艺，并包含全部对结果有影响关键生产工序。。。
1、从配制开始：冻干制剂从液体配料开始，需要更多量培养基，考查最全方面。（如工艺要求配好液体需要在配制罐中蒸汽灭菌应从配制开始）
2、从除菌过滤前开始：考查内容包含除菌过滤系统，考查较全方面，培养基不需要灭菌，需要考虑生物负荷。
3、从除菌过滤后面开始：只考查灌封等操作过程，培养基需要事先灭菌。
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关键原因二: 试验次数和频率
培养基模拟试验初始验证，最少需要成功连续进行 3 次独立模拟试验（提议在不一样工作日进行试验）。
首次验证后，培养基模拟试验通常每年进行2次，每次进行1批即可。
当生产线发生变更，而且经过评定可能对无菌生产工艺有潜在危险时，应该进行额外培养基灌装试验。
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关键原因三: 培养基及培养条件 (1/3)
培养基必须适应广谱微生物生长，包含需氧菌、酵母菌和霉菌（非选择性培养基）。
很好澄明度，较小粘度，易于除菌过滤。
推荐使用大豆消化酪素琼脂培养基(SCD) ，以及大豆胰蛋白胨肉汤(TSB)。
假如产品在缺氧条件、通常在氮气保护下灌装时，或在环境中分离出厌氧菌时，可能需要使用厌氧培养基:液体硫乙醇酸盐培养基(FTM)。
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关键原因三: 培养基及培养条件 (2/3)
培养基必须做促生长试验，按药典方法（10版药典新要求）进行评价。有条件推荐使用1~2种最常见环境分离菌。
促生长试验能够同时或14天培养后进行。用于促生长试验培养基培养前需经过一样工艺步骤（比如清洗、灭菌、充氮、灌装、冻干等）
通常情况，在培养结束后，一些玻璃瓶（从生产开始、中间、结束时取样）进行微生物接种。
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关键原因三: 培养基及培养条件 (3/3)
培养温度
全部样品应在20-35℃(±℃)下培养14天。通常在 20-25℃下 培养 7 天，然后在30-35℃下培养 7 天；或者在30-35℃培养 7 天后，再转移到 20-25℃培养 7 天。
标准：选择温度适宜那些从环境中分离微生物或生物负荷中微生物培养。
关于培养条件选择，补充一个没有形成共识提议，在培养过程前半个周期，将全部产品进行倒置后培养；然后在剩下时间内，将产品恢复直立位置后进行培养。
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关键原因四: 灌装数量
灌装数量应该能够真实反应批量；但允许依据需要，采取最低灌装数量，前提是应足以反应操作员工疲劳时对产品质量潜在影响 ，而且足以表达了尽可能发生干预办法。
普通生产量小于5000，培养基灌装数量应等同批量；生产量大于5000时，培养基最小灌装数量不少于5000。
一些法规中提议应该依据批量确定灌装数量。
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关键原因五: 容器体积(1/2)
应该考虑到灌装容器极端尺寸。
最大容器（通常因为充填体积较大而造成最小充填速度）通常开口较大，所以从环境中微生物侵入潜在风险是最大。
最小容器（通常因为充填体积较小而造成最大充填速度）表达了最大操作难度；小容器更轻易破碎，稳定性差，在设备中更轻易破裂或堵塞。
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关键原因五: 容器体积(2/2)
在最初验证中，能够二次选取最大容器（配合一次最慢、一次最快灌装速度），第三次选取最小容器（配合最快灌装速度）。
在每年2次再验证中，用其它规格尺寸容器轮转试验。
不能使用琥珀色容器，而应该使用透明容器，确保能够目视检测到微生物生长。
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关键原因六: 灌装体积
培养基灌装体积不需要与现实中常规灌装体积一致。（可能因为模拟装量调整过程，使有包含不一致培养基装量）
应确定足够灌装体积，确保能够充分接触到容器和密封部位表面(当它倒置和旋转时)，而且足以目视检测到微生物在培养后生长情况。
较小容器不能灌装太满，因为容器上部空间中应保持足够空气，以支持需氧微生物生长（通常应该保留25%空间）。
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关键原因七: 灌装速度
培养基灌装速度，应符合实际生产灌装速度范围。假如超